miRNA定量PCR檢測(cè)

一、技術(shù)簡(jiǎn)介
miRNA是長(zhǎng)片段RNA序列的一部分，短小的非編碼的單鏈RNA，由大約70 nt大小的可形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)的前體加工而來(lái)，通過(guò)與目標(biāo)mRNA的3'端非編碼區(qū)域（3’-untranslated region，3’-UTR）互補(bǔ)。Northern blot分析的靈敏度低、通量差仍是其主要不足。實(shí)時(shí)定量PCR由于其靈敏度高、方便快速成為檢測(cè)的一個(gè)不錯(cuò)選擇。
由于成熟的miRNA僅為21-23 nt，不能通過(guò)傳統(tǒng)方法進(jìn)行發(fā)轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而進(jìn)行定量�？稍O(shè)計(jì)反轉(zhuǎn)錄引物與成熟miRNA結(jié)合，形成反轉(zhuǎn)錄引物/成熟miRNA復(fù)合物，并在miRNA的5’末端延伸。這樣就得到一個(gè)較長(zhǎng)的反轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增因子，為進(jìn)一步做實(shí)時(shí)定量PCR提供了符合要求的摸板。
二、實(shí)驗(yàn)流程
1. 提取樣本中的RNA。
2. 反轉(zhuǎn)錄。
3. 熒光定量PCR。
三、服務(wù)說(shuō)明及結(jié)果
1. 客戶提供：檢測(cè)樣本（組織或細(xì)胞），或純化好的RNA。
2. 公司提供：基本實(shí)驗(yàn)步驟、圖片、分析結(jié)果。
3. 實(shí)驗(yàn)周期：10個(gè)工作日。

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