慢病毒包裝系統(tǒng)介紹
(1)慢病毒載體,含有外源基因片段、外源基因的啟動(dòng)子,以及其它病毒包裝、整合所需的順式作用元件;
(2)包裝質(zhì)粒:含有病毒包裝所必需的反式作用元件;通常由2-3個(gè)質(zhì)粒組成,含有3個(gè)組要結(jié)構(gòu)蛋白,gag:編碼病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白;pol:編碼病毒蛋白水解酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和整合酶;env(VSV-G) :編碼病毒包膜蛋白
(3)表達(dá)慢病毒用的包裝細(xì)胞:通常是用293T 細(xì)胞株,能夠在慢病毒載體和包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染后產(chǎn)出慢病毒。
慢病毒的優(yōu)勢
(1)宿主范圍廣,可以感染分裂或者非分裂的細(xì)胞,也可以感染質(zhì)粒較難感染的細(xì)胞;
(2)具有整合性,可攜帶外源基因整合到宿主中,在靶細(xì)胞中得到持續(xù)高效穩(wěn)定的表達(dá)
(3)包裝容量大,可以攜帶大約5kb的外源片段
(4)滴度高,通常滴度可以達(dá)到10
8~10
10 TU/mL。
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華丘生物專注于整體生物醫(yī)學(xué)課題研究,如生物科研課題、醫(yī)學(xué)課題、畢業(yè)課題等的技術(shù)服務(wù)?商峁┌ㄋ椒肿由飳W(xué)實(shí)驗(yàn)(如載體構(gòu)建,基因調(diào)取、基因定點(diǎn)突變、實(shí)時(shí)定量 PCR)、細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)(如原代細(xì)胞培養(yǎng),慢病毒包裝,穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建、細(xì)胞功能檢測、雙熒光報(bào)告基因檢測)、蛋白-蛋白以及蛋白-核酸互作實(shí)驗(yàn)(如CoIP免疫共沉淀,TAP串聯(lián)親和純化,Pull down技術(shù),RNA Pull down,RIP RNA結(jié)合蛋白免疫共沉淀,DNA Pull down,ChIP染色質(zhì)免疫共沉淀)以及蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)實(shí)驗(yàn),為研究者提供一站式生物技術(shù)服務(wù)。