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慢病毒包裝
慢病毒包裝是將外源基因包裝到病毒的外殼中,利用病毒對宿主細(xì)胞的感染性,將外源基因整合到細(xì)胞基因組內(nèi)的技術(shù)。慢病毒具有轉(zhuǎn)染效率高、可以永久表達(dá)目的基因以及高度安全性等特點(diǎn).
服務(wù)類別:分子與細(xì)胞總訪問:243
最后更新:2022-11-28半年訪問:65
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慢病毒包裝系統(tǒng)介紹
(1)慢病毒載體,含有外源基因片段、外源基因的啟動(dòng)子,以及其它病毒包裝、整合所需的順式作用元件;
(2)包裝質(zhì)粒:含有病毒包裝所必需的反式作用元件;通常由2-3個(gè)質(zhì)粒組成,含有3個(gè)組要結(jié)構(gòu)蛋白,gag:編碼病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白;pol:編碼病毒蛋白水解酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和整合酶;env(VSV-G) :編碼病毒包膜蛋白
(3)表達(dá)慢病毒用的包裝細(xì)胞:通常是用293T 細(xì)胞株,能夠在慢病毒載體和包裝質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染后產(chǎn)出慢病毒。
慢病毒的優(yōu)勢
(1)宿主范圍廣,可以感染分裂或者非分裂的細(xì)胞,也可以感染質(zhì)粒較難感染的細(xì)胞;
(2)具有整合性,可攜帶外源基因整合到宿主中,在靶細(xì)胞中得到持續(xù)高效穩(wěn)定的表達(dá)
(3)包裝容量大,可以攜帶大約5kb的外源片段
(4)滴度高,通常滴度可以達(dá)到108~1010 TU/mL。
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