標(biāo)簽抗體(Tag Antibody)是一類特異性抗體,能夠識(shí)別并結(jié)合到融合蛋白上的特定標(biāo)簽序列,用于檢測(cè)和純化目標(biāo)蛋白,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)表達(dá)、定位、相互作用和功能研究等領(lǐng)域。標(biāo)簽抗體與瓊脂糖珠結(jié)合后,可以有效地從細(xì)胞裂解液中拉下與之結(jié)合的蛋白,實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)蛋白的分離和純化,常應(yīng)用于免疫沉淀和蛋白純化。
mCherry
mCherry是生物研究中最常用的紅色熒光蛋白(RFP),是一種單體形式的紅色熒光蛋白,從圓盤?募t色熒光蛋白DsRed經(jīng)由基因改造而來。mCherry的最大吸收和發(fā)射波長分別位于587nm和610nm左右,融合表達(dá)在目的蛋白時(shí),mCherry熒光蛋白的活性和目的蛋白功能獨(dú)立無顯著相互影響。
mCherry優(yōu)勢(shì)
熒光亮度高:在紅色光譜范圍內(nèi)具有較好的熒光特性,在成像時(shí)可以提供強(qiáng)烈的信號(hào)。
優(yōu)異的光穩(wěn)定性:對(duì)光致漂白的耐受性較強(qiáng),即使在長時(shí)間的光照下也能保持穩(wěn)定的熒光信號(hào)。
背景熒光低:在標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中可提供清晰而顯著的熒光標(biāo)記,有利于細(xì)胞觀察計(jì)數(shù)。
快速成熟時(shí)間快:t0.5僅為15分鐘,利于啟動(dòng)子活性報(bào)告系統(tǒng)中快速反應(yīng)。
單體形式:不依賴于其他亞基形成活性形式,融合時(shí)不會(huì)破壞其功能結(jié)構(gòu)。
適合活細(xì)胞成像:mCherry適合于活細(xì)胞成像,可以用來研究基因表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。
廣泛的適應(yīng)性:已經(jīng)廣泛用于原核細(xì)胞和真核細(xì)胞。適用于多種生物學(xué)實(shí)驗(yàn),包括啟動(dòng)子活性研究、熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)和其他定量實(shí)驗(yàn)。
操作簡便:mCherry的表達(dá)系統(tǒng)無需添加誘導(dǎo)劑,且適用于誘導(dǎo)劑添加困難場(chǎng)景,如重組菌在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胃腸道環(huán)境中表達(dá)蛋白。
與其他熒光蛋白或報(bào)告基因結(jié)合使用:可進(jìn)行多色標(biāo)記和共定位研究,可以與CRISPR激活系統(tǒng)結(jié)合,用于監(jiān)測(cè)內(nèi)源基因的表達(dá)。
mCherry的諸多優(yōu)勢(shì)高亮度、快速成熟、良好的光譜特性、單體形式、低背景干擾、適用于活細(xì)胞成像、與其他系統(tǒng)的兼容性、廣泛的適用性、有助于功能研究以及簡化操作過程。這些特性使得mCherry成為研究基因表達(dá)和細(xì)胞生物學(xué)功能的強(qiáng)大工具。
S-RMab® RFP/mcherry 瓊脂糖珠
斯達(dá)特上新Rabbit Anti-RFP/mcherry agarose beads,以4%的瓊脂糖凝膠為基質(zhì),可高親和力結(jié)合mCherry蛋白。
√ 高效抓取:每25μl瓊脂糖可結(jié)合15μg RFP融合蛋白
√ 應(yīng)用多樣:純化含有RFP標(biāo)簽的融合蛋白、免疫沉淀
√ 精選現(xiàn)貨:現(xiàn)貨抗體隨時(shí)響應(yīng)。
部分產(chǎn)品數(shù)據(jù)展示
Rabbit Anti-RFP/mcherry agarose beads
RFP/mcherry標(biāo)簽融合蛋白使用酸性洗脫緩沖液洗脫
Lane 1: Input
Lane 2: Flow-through
Lane 3: RFP fusion protein.
mCherry Recombinant Rabbit mAb
WB結(jié)果
泳道1:293T細(xì)胞裂解物
泳道2:293T空載細(xì)胞裂解物
泳道3:293T轉(zhuǎn)Histone H3-mCherry-E-tag細(xì)胞裂解物