高通量測(cè)序服務(wù)

測(cè)序服務(wù)

服務(wù)簡(jiǎn)介

七十年代后期，Gilbert等發(fā)明了用化學(xué)方法測(cè)定DNA序列，同時(shí)Sanger也創(chuàng)立了雙脫氧法,又稱酶切法用于測(cè)定DNA序列。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，DNA測(cè)序越來(lái)越趨于自動(dòng)化，精確度和可讀片段長(zhǎng)度也不斷提高，這使得DNA測(cè)序走向產(chǎn)業(yè)化。DNA測(cè)序是重要的分子生物學(xué)分析手段之一，它不僅為基因表達(dá)、基因調(diào)控等生物學(xué)基礎(chǔ)研究提供重要數(shù)據(jù)，而且也在疾病診斷學(xué)、基因治療等應(yīng)用研究中起著重要作用

服務(wù)特色

1、多臺(tái)3730 等測(cè)序設(shè)備，可以為客戶提供高通量、高質(zhì)量測(cè)序和片段分析服務(wù)

2、復(fù)雜序列測(cè)序準(zhǔn)確率在90% 以上：對(duì)于高GC 含量或者二級(jí)結(jié)構(gòu)未知的復(fù)雜序列有著較高的成功率

3、大規(guī)模DNA 測(cè)序：為基因組學(xué)領(lǐng)域的研究提供了專業(yè)支持

4、可以采用最先進(jìn)的454，solid和solexa 等測(cè)序方法進(jìn)行大片段或基因組的測(cè)序，且可以進(jìn)行專業(yè)的生物信息學(xué)分析

服務(wù)價(jià)格

注：若樣品長(zhǎng)度為1.3～7 kb ，我們將設(shè)計(jì)、合成Walking 引物完成測(cè)序，Walking 引物價(jià)錢另算

DNA 測(cè)序樣品要求

1、菌液----需要200 μl 以上的新鮮菌液。裝在1.5 ml 離心管中并用封口膜封好交給我們的銷售人員。我們的常規(guī)培養(yǎng)基為L(zhǎng)B，培養(yǎng)溫度為37 ℃，常規(guī)抗生素為氨芐青霉素、卡那霉素、氯霉素；如果使用特殊抗生素，請(qǐng)?zhí)峁﹥?chǔ)存液并告知濃度以及工作濃度

2、質(zhì)粒----不提倡用戶提供純化的質(zhì)粒。原則上，我們不提倡客戶提供已純化的質(zhì)粒進(jìn)行測(cè)序。但是以下情況請(qǐng)直接提供DNA 模板：   ◆ 噬菌體       ◆ DNA 低拷貝質(zhì)粒      ◆ cosmid, BAC DNA 。請(qǐng)純化DNA 模板時(shí)注意：純化的DNA 模板要求純度高。純化以后的DNA 模板要溶解于無(wú)菌去離子水。濃度要求>200 ng/μl，(載體較大的，請(qǐng)?zhí)峁?gt;500 ng/μl)，提供20 μl 以上（一般情況下，經(jīng)測(cè)序部檢測(cè)合格后才可使用）。無(wú)論按照1或2提供菌液或質(zhì)粒，請(qǐng)務(wù)必寫(xiě)明：A.質(zhì)粒的名稱B.插入片段的大小C.選取的測(cè)序引物名稱D. 如果提供特殊測(cè)序引物，請(qǐng)一定寫(xiě)明序列，并且一定要提供經(jīng)PAGE純化的引物，濃度大于5 pmol/μl

3、PCR 產(chǎn)物----包括純化及未純化。未純化的PCR產(chǎn)物經(jīng)我們回收后無(wú)論測(cè)序成功與否,我們將收取一定的純化費(fèi)用，所以客戶提供PCR 產(chǎn)物時(shí)事先要進(jìn)行鑒定。確信PCR產(chǎn)物為單一擴(kuò)增條帶，總量必須大于2 μg。

4、測(cè)序用引物的說(shuō)明A.引物必須是PAGE 純化的。請(qǐng)注明引物序列  B.引物濃度大于5 pmol/μl, 且注明具體濃度C.當(dāng)客戶提供的樣品為菌液或質(zhì)粒時(shí)，建議客戶用載體上的引物測(cè)序  D.引物長(zhǎng)度大于25 base，小于18 base 不適合測(cè)序E.客戶提供引物序列，請(qǐng)注明是否需要我們合成。

5、我們可以免費(fèi)提供的的通用引物：M13F/ M13R、T7/ SP6、M13F(-47) / M13R(-48) 以及T7 promoter、T7 terminator、T3 promoter、SP6 promoter、pGEX 3’、 pGEX 5’、 AOX 3’、AOX 5’、 BGH rev.、 pQE30F、 pQE30R、 pEGFP-C-5’、 pEGFP-C-3’、pEGFP-N-5’、pEGFP-N-3’、 S.tag、 U6-5’、 a-factor、 pBV220 F、pBV220 R等。