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cDNA文庫構(gòu)建
cDNA 文庫(Complementary DNA Library)是指某生物某發(fā)育時期所轉(zhuǎn)錄的全部 mRNA 經(jīng)反轉(zhuǎn)錄形成的 cDNA 片段與某種載體連接而形成的克隆的集合。
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最后更新:2022-8-30半年訪問:47
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服務簡介
cDNA 文庫(Complementary DNA Library)是指某生物某發(fā)育時期所轉(zhuǎn)錄的全部 mRNA 經(jīng)反轉(zhuǎn)錄形成的 cDNA 片段與某種載體連接而形成的克隆的集合。cDNA 是便于克隆和大量表達,它不像基因組含有內(nèi)含子而難于表達,因此可以從 cDNA 文庫中篩選到所需的目的基因,并直接用于該目的基因的表達。
通過構(gòu)建 cDNA 表達文庫可以提供構(gòu)建分子標記連鎖圖譜的所用探針 ,更重要的是可以用于分離全長基因進而開展基因功能研究。因此,cDNA 文庫在研究具體某類特定細胞中 基因組的表達狀態(tài)及表達基因的功能鑒定方面具有特殊的優(yōu)勢,從而使它在個體發(fā)育、細胞 分化、細胞周期調(diào)控、細胞衰老和死亡調(diào)控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應用價值。

文庫質(zhì)量標準
庫容≥1.0×10⁶,普通樣品平均插入片段長度≥1.0 kb

服務流程
1、總RNA提。
2、mRNA純化;
3、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈;
4、PCR擴增合成雙鏈cDNA;
5、分級分離雙鏈cDNA,去除小片段DNA;
6、雙鏈cDNA的消化與連接。

樣本要求
請您提供新鮮的且盡量多的材料
1、如果實驗材料為動物組織材料,樣品質(zhì)量需大于5g。
2、如果實驗材料為植物樣品標本,樣品質(zhì)量需大于20g。 
3、如果實驗材料為各種培養(yǎng)細胞,請您提供5×107以上培養(yǎng)好的細胞。 
4、您也可以直接提供給我們Total RNA,但要保證RNA沒有降解,需要通過電泳等方法進行判斷,其純度要求A260/A280≥1.8,樣品總量需大于500ug。 
 
服務說明
關于實驗的具體內(nèi)容及要求,請與我們聯(lián)系溝通。 如果您提供給我們Total RNA樣品,我們首先需要進行RNA質(zhì)量及純度的檢測。 實驗過程中,我們會隨時與您溝通所發(fā)生的問題,以便雙方共同協(xié)商解決。 
我們可以對構(gòu)建好的文庫提供后續(xù)附加服務,如克隆菌保、PCR擴增、大量測序等,實驗費用需另計。
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