zetalife HCT116 (人結(jié)腸癌細(xì)胞)

HCT116 (人結(jié)腸癌細(xì)胞) 高效率轉(zhuǎn)染shRNA--

一、HCT116 (人結(jié)腸癌細(xì)胞)shRNA轉(zhuǎn)染步驟：

1、合成shRNA時(shí)請(qǐng)帶熒光，若shRNA不帶熒光、請(qǐng)使用熒光對(duì)照，方便查看轉(zhuǎn)染效率

2、shRNA濃度：20uM/L

3、shRNA和轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物制備：shRNA取8ul和轉(zhuǎn)染試劑取8ul，吹打混勻室溫靜置15分鐘，無(wú)需另外加入任何試劑稀釋

4、細(xì)胞轉(zhuǎn)染前狀態(tài)：拍10和20倍鏡細(xì)胞明場(chǎng)照片留存

5、貼壁細(xì)胞鋪板：6孔板完全培養(yǎng)基2ml、培養(yǎng)基中不加雙抗，細(xì)胞密度：60%左右

6、轉(zhuǎn)染：將復(fù)合物加入后輕搖混勻、放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)

7、換液：合計(jì)轉(zhuǎn)染24小時(shí)后培養(yǎng)基換液

8、轉(zhuǎn)染效率：總計(jì)轉(zhuǎn)染48小時(shí)后拍熒光照片，查看轉(zhuǎn)染效率

9、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀態(tài)：拍10和20倍鏡細(xì)胞明場(chǎng)照片留存

10、檢測(cè)：轉(zhuǎn)染48小時(shí)后提取RNA或蛋白檢測(cè)

二、公司介紹

上海轉(zhuǎn)染生物科技有限公司是服務(wù)于高校和科研院所生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、細(xì)胞生物學(xué)產(chǎn)業(yè)化等相關(guān)領(lǐng)域的高科技生物技術(shù)企業(yè)。我們服務(wù)于生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物制品生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域等客戶。提供的第三代細(xì)胞內(nèi)可代謝的ZetaLife AdvancedDNA\RNA轉(zhuǎn)染試劑，解決了部分細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染毒性大、需要無(wú)血清環(huán)境的這些問(wèn)題；提供的in vivo Advanced活體動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑可以通過(guò)靜脈注射或體內(nèi)局部組織注射的方式完成轉(zhuǎn)染過(guò)程; 提供的inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清D 細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)支持；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全部人源化、細(xì)胞培養(yǎng)可分解的3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品等。

美國(guó)Zeta Life 公司與美國(guó)加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開(kāi)發(fā)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。