當(dāng)前位置 > 技術(shù)服務(wù) > 生物研發(fā)服務(wù)> 其他生物研發(fā) > 酵母單雜交技術(shù)服務(wù)-酵母單雜交建庫篩庫-南京正和生物
|
正和生物的酵母單雜交服務(wù)不同于其他公司，是使用優(yōu)化后的clonetech的pGADT7或者pGADT7-Rec2兩套載體構(gòu)建酵母文庫，并且能夠提供輔助啟動(dòng)子的設(shè)計(jì)及誘餌載體的構(gòu)建。
|
|||||||||||||||||
| [發(fā)表評(píng)論] [本類其他服務(wù)] [本類其他服務(wù)商] | ||||||||||||||||||
| 服務(wù)商： 南京正和生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
酵母單雜交是在酵母細(xì)胞內(nèi)研究DNA與蛋白質(zhì)之間的相互作用的一種技術(shù)。在DNA與蛋白質(zhì)相互作用研究中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①鑒定已知DNA和已知蛋白質(zhì)之間是否存在相互作用;②分離結(jié)合于目的順式調(diào)控元件或其他短DNA結(jié)合位點(diǎn)的新蛋白質(zhì);③準(zhǔn)確定位已經(jīng)證實(shí)的具有相互作用的DNA結(jié)合位點(diǎn)和對(duì)蛋白質(zhì)的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域進(jìn)行分析。
實(shí)驗(yàn)流程
- 輔助啟動(dòng)子的設(shè)計(jì)及誘餌載體的構(gòu)建；
- 誘餌質(zhì)粒的自激活檢測(cè)；
- 文庫質(zhì)粒和誘餌質(zhì)粒共轉(zhuǎn)酵母感受態(tài)細(xì)胞；
- 文庫篩選和3AT或者ABA優(yōu)化；
- 文庫篩選結(jié)果測(cè)序分析；
- 篩選結(jié)果回轉(zhuǎn)驗(yàn)證。
- 詳細(xì)報(bào)告的整理和數(shù)據(jù)發(fā)送。
1：使用定制特色文庫：使用優(yōu)化后的clonetech的pGADT7或者pGADT7-Rec2兩套載體構(gòu)建酵母文庫；
2：使用商品化cDNA文庫。
二、酵母單雜交原理
2：使用商品化cDNA文庫。
許多真核生物的轉(zhuǎn)錄激活因子具有2個(gè)功能獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域，即特異結(jié)合于順式作用元件上的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DNA—bindingdomain，BD)和發(fā)揮基因調(diào)控功能的DNA激活結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(activationdomain，AD)，這兩個(gè)結(jié)構(gòu)域單獨(dú)作用均不能啟動(dòng)下游報(bào)告基因的表達(dá)。酵母單雜交技術(shù)就是依據(jù)這個(gè)原理，通過構(gòu)建可與轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域結(jié)合的蛋白，然后與特異的DNA序列相結(jié)合，進(jìn)而啟動(dòng)下游報(bào)告基因的表達(dá)。
三、酵母單雜交技術(shù)特點(diǎn)
1、酵母單雜交技術(shù)簡(jiǎn)單易行，在這個(gè)過程中，可直接識(shí)別與順式作用元件結(jié)合的蛋白質(zhì)，也可以直接從文庫中篩選到蛋白質(zhì)的編碼序列，而不需要分離純化蛋白等操作步驟;
2、酵母是真核生物的模式物種，在其體內(nèi)進(jìn)行研究更接近真核生物的基因表達(dá)調(diào)控情況;
3、利用酵母單雜交技術(shù)檢測(cè)到的與DNA相互作用的蛋白質(zhì)處于自然構(gòu)象，避免了體外研究中的不足。
4、市面上已有多種商品化的酵母單雜交體系的試劑盒和相應(yīng)的cDNA文庫，為酵母單雜交體系的使用提供了有利的條件。
四、服務(wù)詳情
2、酵母是真核生物的模式物種，在其體內(nèi)進(jìn)行研究更接近真核生物的基因表達(dá)調(diào)控情況;
3、利用酵母單雜交技術(shù)檢測(cè)到的與DNA相互作用的蛋白質(zhì)處于自然構(gòu)象，避免了體外研究中的不足。
4、市面上已有多種商品化的酵母單雜交體系的試劑盒和相應(yīng)的cDNA文庫，為酵母單雜交體系的使用提供了有利的條件。
| 服務(wù)步驟 | 周期（工作日） | 交付材料 | 報(bào)價(jià) |
|---|---|---|---|
| A、誘餌質(zhì)粒的合成及擴(kuò)增 | 15-20 | 1、誘餌質(zhì)粒 2、自激活檢測(cè)圖片 3、初篩圖片 4、復(fù)篩圖片 5、測(cè)序及分析結(jié)果+陽性克隆菌液 6、驗(yàn)證圖片+驗(yàn)證的AD質(zhì)粒 7、驗(yàn)證圖片 8、項(xiàng)目報(bào)告 |
詢價(jià) |
| B、線性化誘餌質(zhì)粒 | 10-15 | ||
| C、整合線性化誘餌質(zhì)粒至Y1H | |||
| D、鑒定測(cè)序及比對(duì)分析 | |||
| E、自激活檢測(cè) | |||
| F、初篩 | 15-20 | ||
| G、復(fù)篩 | |||
| H、陽性克隆測(cè)序 | |||
| I、一對(duì)一驗(yàn)證（點(diǎn)對(duì)點(diǎn)） | 15-20 | ||
| J、點(diǎn)板驗(yàn)證 | |||
| K、項(xiàng)目結(jié)束 |
- 百蓁生物邀您相約第十五屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)
- 萊艾特邀您參加實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施衛(wèi)生管理交流會(huì)
- Lonza講座:微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境監(jiān)控?zé)o紙化策略實(shí)現(xiàn)之路
- 重慶市科技局領(lǐng)導(dǎo)一行蒞臨威斯騰生物指導(dǎo)參觀
- 萊艾特科技誠聘技術(shù)工程師、售后支持與商務(wù)助理
- �；飬f(xié)助代理商推行基質(zhì)膠小規(guī)格試用裝申領(lǐng)活動(dòng)
- 講座：雙特異性抗體的細(xì)胞株構(gòu)建篩選與馴化策略
- 發(fā)文有獎(jiǎng)！引用MG&ABW基質(zhì)膠發(fā)文，領(lǐng)取百萬獎(jiǎng)學(xué)金！
- 小分子不同靶點(diǎn)篩選方案的技術(shù)路線、優(yōu)勢(shì)及經(jīng)典案例分享
- 單細(xì)胞RNA測(cè)序技術(shù)解析人類胎盤在足月分娩期間的母體-胎兒信號(hào)傳導(dǎo)
- 從設(shè)計(jì)到表達(dá)：人鼠嵌合抗體的制備全過程
- 多肽藥物篩選中的關(guān)鍵技術(shù)：特異性多肽篩選與合成肽庫篩選
- 利用噬菌體展示技術(shù)在多肽藥物篩選中的前景
- 探索新領(lǐng)域：膜體系酵母雙雜交技術(shù)的應(yīng)用與挑戰(zhàn)
- 恒溫?cái)U(kuò)增結(jié)合CRISPR技術(shù)應(yīng)用
- 馬英新團(tuán)隊(duì)開發(fā)RPA-CRISPR/Cas12a系統(tǒng)，用于快速靈敏檢測(cè)非洲豬瘟
更多
瀏覽該公司同類服務(wù)
瀏覽該公司同類服務(wù)
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com