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酶學實驗

酶學活性試驗
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最后更新:2022-3-9半年訪問:19
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酶學實驗作為最簡單的生物反應體系,能夠準確地反映出待評價化合物對于特定的酶的抑制或者活化能力。雖然酶學反應體系很簡單,但是開發(fā)一個可以用于評價化合物的酶學體系仍然充滿挑戰(zhàn)。
對于一個酶學實驗的開發(fā)與驗證,通常需要一下幾個步驟:
確認合適的底物并確定反應信號與酶濃度的線性關(guān)系范圍
選擇合適的反應體積(微孔板)并優(yōu)化反應緩沖液
測定米氏常數(shù)以確定ATP濃度
反應動力學測定
利用對照化合物進行方法驗證
在項目進行過程中對方法進一步優(yōu)化并驗證
在拓維生物,我們會對每一個酶學方法按照上述的步驟進行優(yōu)化。更加具體的內(nèi)容,請參考酶學方法開發(fā)與驗證(鏈接到技術(shù)資源部分)
酶學實驗通量可以為96-孔板或者384-孔板篩選。
反應類型包括TR-FRET/HTFRAlpha-screenAlphaLISATranscreener assay, ADP-Glo™ Kinase Assay 等。
拓維生物已經(jīng)開發(fā)驗證的酶學方法包括:TRKA wt, TRKA G595R, TRKA G667C, TRKB wt, TRKC wt, TRKC G696A, TRKC G623C, ALK, MET, MET F1200I, ROS1等。
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