亞細(xì)胞定位技術(shù)服務(wù)
1、實(shí)驗(yàn)介紹:
亞細(xì)胞定位技術(shù)服務(wù)是將目標(biāo)蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合,通過瞬時(shí)轉(zhuǎn)化技術(shù)或者遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù),使得該融合蛋白在受體材料細(xì)胞內(nèi)表達(dá),目標(biāo)蛋白會(huì)牽引熒光蛋白一起定位到目標(biāo)細(xì)胞器,通過觀察熒光蛋白在細(xì)胞內(nèi)顯示的位置,確定目標(biāo)蛋白的位置,從而確定目標(biāo)蛋白的
亞細(xì)胞定位情況。
2、實(shí)驗(yàn)用途:因?yàn)榈鞍椎墓δ芎臀恢檬菍?duì)應(yīng)的,例如一個(gè)光合作用相關(guān)的蛋白一定要定位在葉綠體內(nèi),所以通過
亞細(xì)胞定位技術(shù)服務(wù)研究可以進(jìn)一步佐證出目標(biāo)蛋白的功能。
3、實(shí)驗(yàn)流程:實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)溝通——訂單/實(shí)驗(yàn)材料確認(rèn),簽訂合同——全基因合成或者基因克隆(如果客戶未提供測(cè)序完成的目標(biāo)基因)——實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)——過表達(dá)載體構(gòu)建——遺傳轉(zhuǎn)化/瞬時(shí)轉(zhuǎn)化——激光共聚焦觀察拍攝照片
亞細(xì)胞定位(后兩步為可選項(xiàng))
4、客戶需要提供的信息:
4.1、目標(biāo)基因ORF
4.2、基因名稱等注釋信息,如果特別要求請(qǐng)?jiān)趥渥⒅凶⒚鳌?br />
4.3、如果不是我公司代為構(gòu)建載體,客戶需提供質(zhì)粒(質(zhì)粒濃度為>200ng/ul)以及菌液各一份。注明菌液抗性,熒光蛋白的顏色或者激發(fā)光和發(fā)射光波長(zhǎng)。
亞細(xì)胞定位
5、服務(wù)內(nèi)容:
亞細(xì)胞定位技術(shù)服務(wù)內(nèi)容包括,基因克隆、載體構(gòu)建與驗(yàn)證、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染、共聚焦顯微鏡觀察拍照。各項(xiàng)目可整體檢測(cè)也可單獨(dú)檢測(cè)?蛻籼峁┵|(zhì)粒,質(zhì)粒圖譜、轉(zhuǎn)基因植株或者種子均可。
6、客戶須知:激光共聚焦顯微鏡觀察拍照。我們提供4倍,10倍,20倍,40倍的照片可選。客戶需要確認(rèn)拍照的倍數(shù),每個(gè)倍數(shù)提供3張照片:熒光
亞細(xì)胞定位圖,DIC圖和Merge圖。
7、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
7.1、構(gòu)建好的載體的圖譜、全序列和注釋信息;
7.2、構(gòu)建部位的測(cè)序結(jié)果;
7.3、構(gòu)建好的載體及其保存菌株(可選);
7.4.、
亞細(xì)胞定位激光共聚焦整理圖片和原始圖片(可選項(xiàng))
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