文庫構(gòu)建

葉民生物擁有一批優(yōu)秀的文庫構(gòu)建專業(yè)技術(shù)人員，具有豐富的建庫經(jīng)驗(yàn)和成熟的實(shí)驗(yàn)方法，在cDNA合成、消化、連接及轉(zhuǎn)化等方面擁有成熟的技術(shù)，建成的文庫全長(zhǎng)cDNA比例高，可用于大規(guī)�；�因測(cè)序和目的基因的篩選。可以針對(duì)動(dòng)物、植物、微生物等組織和細(xì)胞等材料進(jìn)行文庫構(gòu)建。本公司可提供全方位的cDNA文庫構(gòu)建，包括：普通cDNA文庫、全長(zhǎng)cDNA文庫、均一化cDNA文庫、差減cDNA文庫。

樣品要求
動(dòng)物、植物、微生物組織 請(qǐng)?zhí)峁┳懔康男迈r樣品（4℃保存，不超過一天）或?qū)⑿迈r樣品立即存于液氮或-80℃后保存不超過一個(gè)星期。

注意： 用植物樣品建基因組文庫，為了降低文庫中的葉綠體污染，樣品須是植物的黃化苗嫩芽。若需建cDNA文庫，樣品必須是新鮮保存的。

RNA 如要提供RNA，要求總RNA＞500ug，濃度＞1ug/ul；mRNA＞3ug，濃度＞50ng/ul；OD260/OD280值：2.0，以我方電泳膠圖、紫外分析儀定量為準(zhǔn)。 RNA 的總量根據(jù)庫容量不同會(huì)有所增加。

注意： a) 建議由我方提取RNA；b) 對(duì)于客戶提供的RNA，由于樣品原因建庫可能沒有結(jié)果或結(jié)果不好，其損失和責(zé)任全部由樣品提供方承擔(dān)；c)由樣品質(zhì)量產(chǎn)生的任何問題，其損失和責(zé)任應(yīng)全部由樣品提供方承擔(dān)。

純化后 DNA 請(qǐng)?zhí)峁�樣品濃度�?0ng/ul ，最小量＞20ug，OD 260 /OD 280值：1.80～2.00 ，請(qǐng)附上樣品的原電泳膠圖；定量以我方電泳膠圖、紫外分析儀定量為準(zhǔn)。DNA 的總量根據(jù)庫容量不同會(huì)有所增加。若樣品未純化，我們將收取純化費(fèi)用。

注意： 為了更好的保持RNA和DNA的狀態(tài)，防止樣品的降解，樣品在運(yùn)輸時(shí)必須保持低溫狀態(tài)。



服務(wù)流程：
1) 業(yè)務(wù)洽談：具體服務(wù)內(nèi)容、時(shí)限要求、付款方式等合同條款，需要事先商定，簽訂合同；
2) 寄送樣品：上海市范圍內(nèi)我們可上門收取樣品，外地客戶需將樣品干冰保存，盡快送達(dá)我公司（可在洽談業(yè)務(wù)時(shí)商定）；
3) 問題反饋：在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)生的問題我們會(huì)及時(shí)向客戶反應(yīng)，以便雙方共同解決，客戶也可隨時(shí)詢問；
4) 結(jié)果發(fā)送：項(xiàng)目完成后，我們會(huì)通知客戶并將各種結(jié)果以合適的方式發(fā)送，并請(qǐng)客戶確認(rèn)；
5) 費(fèi)用收�。嚎蛻艨梢赃x擇支票或者銀行轉(zhuǎn)帳任何一種方式付費(fèi)。

交貨內(nèi)容： A. 產(chǎn)物電泳圖譜； B. 初始庫，保存在－ 20 ℃ ； C. 文庫評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)，包括庫容量，插入片段平均長(zhǎng)度，重組效率 , cDNA 完整性評(píng)價(jià)等。

具體指標(biāo)：
初始基因文庫庫容量 1 × 106pfu 以上，如需擴(kuò)增，擴(kuò)增后容量1×109pfu 以上；
插入片段平均長(zhǎng)度 1.0~1.5kb( 非常規(guī)物種不承諾 ) ；
重組效率大于 90 ％（質(zhì)粒文庫） , 大于 70%( 噬菌體文庫 ) ；
cDNA 的完整性，讀框完整比例 ≥30% 【僅對(duì)長(zhǎng)度為 3 kb 以下的基因而言】。