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單細胞凝膠電泳是一種快速檢測單細胞DNA損傷的實驗方法,因其細胞電泳形狀頗似彗星,叉稱彗星試驗( comet assay)
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概念及原理:
單細胞凝膠電泳是一種快速檢測單細胞DNA損傷的實驗方法,因其細胞電泳形狀頗似彗星,叉稱彗星試驗( comet assay)。該技術(shù)的原理是基于有核細胞的DNA分子量很大,DNA超螺旋結(jié)構(gòu)附著在核基質(zhì)中,用瓊脂糖凝膠將細胞包埋在載玻片上,在細胞裂解液作用下,細胞膜、核膜及其他生物膜破壞,使細胞內(nèi)的RNA、蛋白質(zhì)及其他成分進入凝膠,繼而擴散到裂解液中,惟獨核DNA仍保持纏繞的環(huán)區(qū)附著在剩余的核骨架上,并留在原位。若細胞受損,在堿性電泳液( pH>13)中,先是DNA雙鏈解螺旋且堿變性為單鏈,單鏈斷裂的碎片分子量小即可進入凝膠中,在電泳時斷鏈或碎片DNA向陽極遷移,形成拖尾。
科研及臨床應(yīng)用:
單細胞凝膠電泳是一種快速檢測單細胞DNA損傷的實驗方法,目前已被廣泛應(yīng)用于體內(nèi)或者體外各種有核細胞經(jīng)受試物誘導(dǎo)的DNA損傷、修復(fù)、細胞凋亡、毒理學(xué)、腫瘤治療評價、放射生物學(xué)等方面的研究。
標本采集、保存、運輸:
若是在液氮中凍存細胞,凍存管立即置于干冰中運輸;若是新鮮培養(yǎng)細胞,待細胞鋪滿培養(yǎng)瓶底部(培養(yǎng)48h),將細胞培養(yǎng)瓶加滿培養(yǎng)基,24h內(nèi)(18-37℃)運輸?shù)綄嶒炇。實驗所需試劑和藥品請按照說明書保存條件運輸。
客戶須知:
客戶需提供:
實驗所需的細胞系(1×106個細胞,可傳代),特殊細胞需提供培養(yǎng)基;
實驗所需特殊或不常用試劑和藥品。
報告形式:
本公司提供實驗報告單,含主要實驗步驟、單細胞凝膠電泳熒光圖片。