DNA甲基化是重要的表觀遺傳學(xué)標(biāo)記信息,獲得全基因組范圍內(nèi)所有C位點(diǎn)的甲基化水平數(shù)據(jù),對(duì)于表觀遺傳學(xué)的時(shí)空特異性研究具有重要意義。我們以新一代高通量測(cè)序平臺(tái)為基礎(chǔ),進(jìn)行低成本、高效率、高準(zhǔn)確度的全基因組DNA甲基化水平圖譜繪制。特定物種的高精確度甲基化修飾模式的分析,必將在表觀基因組學(xué)研究中具有里程碑式的意義,并為細(xì)胞分化、組織發(fā)育等基礎(chǔ)機(jī)制研究,以及動(dòng)植物育種、人類健康與疾病研究奠定基礎(chǔ)。
技術(shù)路線
生物信息學(xué)分析
樣品要求
1) 樣品總量:≥ 3ug;
2) 樣品濃度:≥ 50ng/ul。
3) 樣品純度:OD值260/280應(yīng)在1.8~2.0;
4) 樣品質(zhì)量:基因組完整、無(wú)降解、無(wú)污染。
5) 樣品包裝:用封口膜密封樣品,DNA低溫運(yùn)輸(-20℃)。
應(yīng)用案例
Conservation and divergence of methylation patterning in plants and animals Feng S,Cokus SJ et al.(2010) PNAS
背景:
1. 胞嘧啶甲基化是一種存在多種真核生物DNA中的表觀遺傳標(biāo)記,盡管DNA甲基化多在基因沉默中有著保守的作用,但DNA甲基化的水平和模式在不同生物體中存在極大的差異。
2. 利用全基因組鳥(niǎo)槍法重亞硫酸測(cè)序(WGBS-Seq),對(duì)雄蜜蜂、海鞘、小鼠、斑馬魚(yú)、綠衣藻、粳稻、擬南芥、楊樹(shù)8個(gè)物種比較,利用得到的數(shù)據(jù)分析結(jié)果可以幫助研究者選擇合適的模式生物進(jìn)行研究,還可以證明WGBS-Seq的多功能性。
研究方法:
1.從雄蜜蜂、海鞘、小鼠、斑馬魚(yú)、綠衣藻、水稻、擬南芥、楊樹(shù)8個(gè)物種的組織提取DNA。
2.WGBS-Seq測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建。
3.Illumina GA 測(cè)序,分別得到118.4Mb-2.72Gb序列數(shù)據(jù)。
4.生物信息學(xué)分析。
結(jié)果分析:
1. 開(kāi)花植物甲基化模式很類似,均檢測(cè)到甲基化的胞嘧啶。而動(dòng)物中基本都是CG甲基化。除CpG島外,脊椎動(dòng)物整個(gè)基因組都存在甲基化,且大多數(shù)生物基因組甲基化都很保守傾向于外顯子,海鞘和蜜蜂中基因是主要的甲基化靶點(diǎn),綠衣藻有特別的甲基化模式,非CG甲基化主要集中在基因的外顯子而不是重復(fù)序列和轉(zhuǎn)座子中。
2. Dnmt1(Mouse, Zebrafish)/ MET1 (Arabidopsis)的輔助因子Uhrf1(Mouse, Zebrafish)/VIM(Arabidopsis)有著保守的功能,維持小鼠、擬南芥和斑馬魚(yú)基因組中轉(zhuǎn)座子和基因的CG甲基化。
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晶能生物技術(shù)(上海)有限公司(簡(jiǎn)稱“晶能生物”)成立于2010年2月。自成立以來(lái),高速發(fā)展,成為中國(guó)生物技術(shù)服務(wù)行業(yè)領(lǐng)先地位的公司。
晶能生物專注健康醫(yī)療產(chǎn)品和生命科學(xué)領(lǐng)域科技服務(wù),抓住了中國(guó)健康醫(yī)療產(chǎn)業(yè)的巨大機(jī)遇和生命科學(xué)市場(chǎng)的快速成長(zhǎng)勢(shì)頭,形成了以產(chǎn)品研發(fā)和科技服務(wù)為核心,涉足生命科學(xué),臨床疾病、人類健康等領(lǐng)域的產(chǎn)業(yè)化服務(wù)體系,在產(chǎn)品研發(fā)、人才建設(shè)、市場(chǎng)營(yíng)銷、銷售渠道、專業(yè)服務(wù)等方面形成極具競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的中國(guó)知名的高新技術(shù)企業(yè)。
晶能生物注重產(chǎn)品開(kāi)發(fā),成立創(chuàng)新健康醫(yī)療研究中心,資深的專家團(tuán)隊(duì)、國(guó)際先進(jìn)的儀器設(shè)備,完善的管理和研發(fā)體系,讓中心成為一個(gè)充滿激情、力量雄厚、極具發(fā)展?jié)摿Φ难邪l(fā)機(jī)構(gòu)。
晶能生物通過(guò)ISO9001:2008質(zhì)量體系認(rèn)證, 并率先成為illumine CsPro和BioNano官方認(rèn)證服務(wù)商。主要技術(shù)平臺(tái)有BioNano單分子光學(xué)圖譜平臺(tái)、Illumina-Hiseq3000高通量測(cè)序平臺(tái)、Illumina-Hiseq2500高通量測(cè)序平臺(tái)、Illumina-Hiseq1500高通量測(cè)序平臺(tái)、Illumina-Miseq高通量測(cè)序平臺(tái),Illumina-iScan基因芯片平臺(tái)、Illumina-ECO Real Time PCR平臺(tái)、Sequenome-質(zhì)譜分析平臺(tái)、曙光高性能服務(wù)器平臺(tái)以及各種配套設(shè)備,完成項(xiàng)目達(dá)到近2000個(gè),完成專利達(dá)到近10項(xiàng),合作客戶發(fā)表文章影響因子超過(guò)400。晶能生物已取得國(guó)內(nèi)二代測(cè)序,基因芯片等市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì),成為這個(gè)行業(yè)的領(lǐng)先者。
晶能生物奉行客戶第一、共享快樂(lè)、共同成長(zhǎng)、持續(xù)發(fā)展的原則,始終懷著感恩的心態(tài),努力做一個(gè)讓社會(huì)、客戶、員工和股東滿意的企業(yè),并成為提供健康醫(yī)療產(chǎn)品和科技服務(wù)的領(lǐng)導(dǎo)性公司。