發(fā)酵培養(yǎng)基的pH值,對(duì)微生物生長(zhǎng)具有非常明顯的影響,也是影響發(fā)酵過(guò)程中各種酶活的重要因素。因此,pH的監(jiān)測(cè)與調(diào)節(jié),于發(fā)酵過(guò)程而言十分重要。
發(fā)酵過(guò)程中通常是采用復(fù)合pH電極直接插入罐內(nèi)發(fā)酵液的方式對(duì)pH進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。而高壓高溫的滅菌操作和發(fā)酵液的理化性質(zhì)會(huì)對(duì)pH電極測(cè)量造成影響,所以正確的使用方法和日常的維護(hù)保養(yǎng)尤其關(guān)鍵。
1. 安裝使用前的準(zhǔn)備
① 打開(kāi)包裝時(shí),要仔細(xì)檢查電極的pH敏感膜玻璃、隔膜(素?zé)沾尚荆┖筒Aw是否存在機(jī)械損傷。
② 取下盛液套并用純水清洗電極頂部,然后用濕紙巾或者吸水紙輕輕擦干。注意不要摩擦pH敏感膜,以防增加響應(yīng)時(shí)間。
③ 將pH電極平緩移至垂直位置以防pH敏感膜玻璃球泡內(nèi)存有氣泡。如沒(méi)有充滿液體或存有氣泡,應(yīng)輕輕甩動(dòng)電極使球泡內(nèi)充滿液體,直至沒(méi)有氣泡。
④ 電極使用前可先在酸性緩沖液(pH4.01)中浸泡數(shù)分鐘,用純水沖洗玻璃球泡部分,再用吸水紙輕輕將玻璃球泡部分的水吸干,再在中性緩沖液(pH6.86或7.00等)中浸泡數(shù)分鐘以活化電極,然后再開(kāi)始校準(zhǔn)。
2. pH電極兩點(diǎn)校準(zhǔn)操作
將pH電極在標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中浸泡10min,待測(cè)定數(shù)值穩(wěn)定1min左右后,再依次進(jìn)行pH電極的第一點(diǎn)標(biāo)定和第二點(diǎn)標(biāo)定。
② 連接電極,并用純水沖洗電極,沖洗后再用吸水紙輕輕吸干探頭上的水。
③ 將玻璃球泡部分浸沒(méi)在第一種緩沖液(例pH=4.01)內(nèi)(隔膜應(yīng)完全浸沒(méi)在緩沖液中),待標(biāo)準(zhǔn)值穩(wěn)定后(30秒至60秒)點(diǎn)擊第一點(diǎn)確認(rèn),第一點(diǎn)標(biāo)定結(jié)束。
④ 將電極從第一種緩沖液中取出,并用純水沖洗電極,沖洗后再用吸水紙輕輕吸干探頭上的水。
⑤ 將玻璃球泡部分浸沒(méi)在第二種緩沖液(例pH=9.18)內(nèi)(隔膜應(yīng)完全浸沒(méi)在緩沖液中),待標(biāo)準(zhǔn)值穩(wěn)定后(30秒至60秒)點(diǎn)擊第二點(diǎn)確認(rèn),第二點(diǎn)標(biāo)定結(jié)束,等待使用(建議時(shí)間不要太長(zhǎng))。
3. 電極校準(zhǔn)時(shí)的注意事項(xiàng)
① 校準(zhǔn)時(shí)請(qǐng)注意采用新鮮的緩沖液;
② 電極在緩沖液中放置1min后再進(jìn)行后續(xù)操作;
③ 沖洗電極后只能用柔軟的吸水紙吸干水分,切勿摩擦pH敏感膜;
④ 電極的校準(zhǔn)周期根據(jù)不同的使用環(huán)境和精度要求而定,請(qǐng)?jiān)诒WC精度的前提下確定適當(dāng)?shù)男?zhǔn)周期;
⑤ 由于pH電極探頭及其易碎,所以在使用過(guò)程中切勿磕碰。
所謂溫度補(bǔ)償,是將電極在標(biāo)定溫度下(一般為25℃)得到的斜率按能斯特公式換算到當(dāng)前溫度下的斜率,從而得到當(dāng)前溫度下正確的pH值。主要用來(lái)修正由于標(biāo)準(zhǔn)緩沖液等標(biāo)樣在標(biāo)定時(shí)的溫度與實(shí)際樣品溶液溫度不同引起的偏差。
HOLVES系列產(chǎn)品可以通過(guò)設(shè)備的溫度電極測(cè)量到當(dāng)前液體溫度,然后通過(guò)自身軟件計(jì)算后,顯示經(jīng)溫度補(bǔ)償后的pH值。所以,無(wú)論是校準(zhǔn)還是性能測(cè)試,都需要確保設(shè)備的溫度電極是工作狀態(tài)。
HOLVES系列發(fā)酵罐可直接讀出電極所測(cè)液體的電壓信號(hào),并且如果電極出現(xiàn)問(wèn)題或者安裝、使用錯(cuò)誤,pH校準(zhǔn)界面下方會(huì)彈出電極不可用紅色提示字樣,方便客戶了解電極的使用狀態(tài)。
6. 電極的保存
① 每個(gè)生產(chǎn)周期結(jié)束后,使用去離子水認(rèn)真沖洗電極頭與隔膜,絕不可使這些零件上的測(cè)量溶液變干。
② 電極不可放在蒸餾水中保存,較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí),應(yīng)當(dāng)將其連同電極頭與隔膜充分浸泡在3mol/L的KCI或9816/ViscolytTM電解液內(nèi)。
③ 電極不能長(zhǎng)期干放,不能在表面附有干燥介質(zhì)時(shí)貯存電極。如果因錯(cuò)誤導(dǎo)致電極被干燥存放數(shù)日,應(yīng)在使用之前將其浸泡在正常存儲(chǔ)電解液內(nèi)若干小時(shí)。
④ 應(yīng)時(shí)常檢查連接器是否出現(xiàn)受潮跡象。如有必要,用去離子水或酒精徹底清洗,然后小心擦干。
希望以上的內(nèi)容能對(duì)您的發(fā)酵提供一點(diǎn)幫助,如有問(wèn)題可與我們聯(lián)系,HOLVES將竭誠(chéng)為您服務(wù)!
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