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病理技術(shù)平臺(tái)——免疫熒光
免疫熒光細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量。
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免疫熒光細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素制成熒光標(biāo)記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細(xì)胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量。
實(shí)驗(yàn)流程:組織固定→滅活內(nèi)源性過氧化物酶→PBS清洗—封閉→一抗孵育→PBS清洗→二抗孵育→ PBS清洗→DAPI復(fù)染→防熒光淬滅封片劑封片→熒光顯微鏡觀察,拍照。

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