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采用二代測序與三代測序相結(jié)合的策略,快速完成細(xì)菌基因組完成圖的繪制。
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細(xì)菌基因組測序主要針對無參考序列的物種進行測序,樣品基因組測序后從頭開始組裝。根據(jù)物種本身的特點和測序深度的不同,最終的組裝結(jié)果會存在一定的差異。對于細(xì)菌樣品,最高可組裝成一條完整的序列。根據(jù)組裝結(jié)果,可預(yù)測細(xì)菌基因組中包含的基因,通過功能數(shù)據(jù)庫比對可得到基因的功能注釋信息。在病原菌的致病性、疾病的預(yù)防和治療等方面有廣泛的應(yīng)用。
根據(jù)不同的研究目的與需求,以及不同的組裝程度需求,細(xì)菌基因組測序提供以下兩種產(chǎn)品類型:細(xì)菌框架圖、細(xì)菌完成圖。
生物信息分析內(nèi)容
1、數(shù)據(jù)質(zhì)控
2、Denovo組裝
3、基因組組分分析(基因島、重復(fù)序列、非編碼RNA、基因預(yù)測、CRISPR、前噬菌體)
4、基因功能注釋(COG、KEGG、NR、GO、Swiss-prot)
5、致病性分析(分泌蛋白預(yù)測、PHI、VFDB、ARDB、CAZy)
6、比較基因組分析(共線性分析、Core-pan分析、進化分析)
技術(shù)參數(shù)
產(chǎn)品類型 |
測序平臺 |
建庫策略 |
測序策略 |
指標(biāo) |
項目周期 |
細(xì)菌框架圖 |
HiSeq PE150 |
小片段文庫(350bp) |
≥200X
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初級組裝 |
30個工作日 |
細(xì)菌完成圖 |
PacBio為主,與HiSeq等其他平臺結(jié)合 |
小片段文庫(350bp)+ 大片段文庫(10K) |
小片段文庫(350bp)≥100X 大片段文庫(10K)≥100X |
1 contig, 0 gap |
60個工作日 |
樣本類型:基因組DNA
樣本要求:
DNA小片段文庫:總量≥2 μg,濃度≥50 ng/μL
DNA大片段文庫:總量≥30 μg,濃度≥100 ng/μL
其他要求:DNA無降解,無RNA 、蛋白質(zhì)等雜帶污染
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