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單克隆抗體的分子克隆與嵌合
可以快速的克隆您提供雜交瘤表達(dá)的單克隆抗體的不同區(qū)域。
服務(wù)類別:免疫與抗體總訪問:1827
最后更新:2010-1-29半年訪問:23
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可以快速的克隆您提供雜交瘤表達(dá)的單克隆抗體的可變區(qū)域。被克隆出來的片段將被插入到含有人IgG1輕鏈與重鏈的哺乳細(xì)胞表達(dá)載體上。如果同時(shí)提供抗原,可以將載體轉(zhuǎn)染至CHO-dhfr細(xì)胞中表達(dá)人/鼠嵌合單克隆抗體,應(yīng)用ELISA技術(shù)驗(yàn)證該抗體的特異性。

必需材料:

        1 T-75活細(xì)胞或者1管凍存細(xì)胞

第 I 階段 克隆單抗的可變區(qū)域,2周         市場價(jià)18000元

        •從雜交瘤中RNA 
        •反轉(zhuǎn)錄PCR
        •應(yīng)用我們特有的引物通過PCR方法克隆輕鏈和重鏈的可變區(qū)域
        •將PCR產(chǎn)物連接到T-載體上 
        •測序5個不同的輕鏈和重鏈的克隆
        •報(bào)告測序數(shù)據(jù)

第 II 階段 嵌合                  市場價(jià)58000元

        •將克隆的片段插入到特定的表達(dá)載體,該載體含有人IgG1的恒定區(qū) 
        •應(yīng)用PCR方法確認(rèn)正確連接
        •轉(zhuǎn)染至CHO-dhfr細(xì)胞或NS0/1 細(xì)胞
        •克隆轉(zhuǎn)染陽性細(xì)胞并擴(kuò)增 
        •收集培養(yǎng)液
        •應(yīng)用ELISA法檢測抗體的特異性
        •向客戶提供該表達(dá)質(zhì)粒


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