經(jīng)本平臺(tái)優(yōu)化的基因敲除方法:
1、F0代可見(jiàn)表型的基因敲除方法,可在幾天內(nèi)快速驗(yàn)證篩選基因功能;蚬δ艿尿(yàn)證和篩選幾乎是現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究尤其是致病基因研究中的最重要的內(nèi)容之一。而細(xì)胞水平的基因功能驗(yàn)證與動(dòng)物個(gè)體水平內(nèi)的基因功能往往相差甚遠(yuǎn),也無(wú)法反映其生理與病理意義。我們利用F0代可見(jiàn)表型的斑馬魚(yú)敲除技術(shù)可以在幾天內(nèi)快速驗(yàn)證篩選基因在動(dòng)物個(gè)體水平的真實(shí)功能,尤其在先天性疾病致病基因鑒定領(lǐng)域有重要技術(shù)優(yōu)勢(shì)。
2、快速建立基因敲除品系的實(shí)驗(yàn)方法,可快速建立基因敲除品系。
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斑馬魚(yú)是功能基因組時(shí)代生命科學(xué)研究中最為重要的模式生物之一,已經(jīng)推動(dòng)了遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和疾病研究等多個(gè)領(lǐng)域的研究與應(yīng)用發(fā)展。
斑馬魚(yú)具有胚胎透明、體外發(fā)育等特點(diǎn),主要器官在受精后48小時(shí)內(nèi)基本形成,所有發(fā)育階段的胚胎均可在顯微鏡下操作和觀測(cè),不但可以直接觀察和追蹤基因和細(xì)胞在發(fā)育中的行為,而且易于在整體動(dòng)物模型中研究其調(diào)控機(jī)制。斑馬魚(yú)個(gè)體小,易于低成本地在實(shí)驗(yàn)室大量養(yǎng)殖,遺傳學(xué)和胚胎學(xué)操作比小鼠等哺乳動(dòng)物模型更易于掌握,適合多種疾病模型的建立。另外,斑馬魚(yú)胚胎產(chǎn)量高,可以用高通量方法篩選與基因和細(xì)胞功能相關(guān)的小分子化合物。
中國(guó)科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)卓越創(chuàng)新中心(生化細(xì)胞所)斑馬魚(yú)技術(shù)平臺(tái)籌建于2009年9月,2010年7月開(kāi)始試運(yùn)行。平臺(tái)以科研服務(wù)為宗旨,由專(zhuān)家咨詢(xún)小組提供決策意見(jiàn),對(duì)平臺(tái)日常運(yùn)行工作進(jìn)行監(jiān)督建議,由張?zhí)N斌博士負(fù)責(zé)日常運(yùn)行管理,由經(jīng)驗(yàn)豐富的技術(shù)人員負(fù)責(zé)斑馬魚(yú)品系的建立、保有和繁殖,為全所各課題組提供顯微注射、基因敲除及其它相關(guān)技術(shù)與資源服務(wù)。