AbMole蛋白酶抑制劑Cocktail在WB實驗中的應(yīng)用優(yōu)勢及案例分享
Western Blot（WB）實驗是研究蛋白質(zhì)表達和功能的關(guān)鍵技術(shù)之一。蛋白的提取是WB實驗的第一步，然而，許多科研人員在實驗過程中常常會遇到一個棘手的問題：蛋白質(zhì)降解。這不僅會導(dǎo)致目標蛋白條帶模糊不清，甚至可能讓為期數(shù)天的WB實驗徹底失敗。別擔(dān)心，AbMole蛋白酶抑制劑Cocktail（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）來為您保駕護航，讓您的WB實驗輕松贏在起跑線上！AbMole提供高品質(zhì)抑制劑、細胞因子、人源單抗、靶點蛋白、天然產(chǎn)物、熒光染料、多肽、化合物庫、抗生素，全球大量文獻專利引用。
1. 為什么蛋白質(zhì)降解會成為WB實驗的“絆腳石”？
在細胞裂解或組織提取過程中，原本隱藏在各種細胞器中的蛋白酶可能會被激活，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)降解。這種降解不僅會破壞目標蛋白的完整性，還會影響后續(xù)的檢測效果。例如，目標蛋白可能因為降解而無法被抗體特異性識別，或者在電泳過程中出現(xiàn)多條降解條帶，干擾實驗結(jié)果的解讀。因此，從樣本處理的第一步開始，防止蛋白質(zhì)降解就顯得至關(guān)重要。AbMole是ChemBridge中國區(qū)官方指定合作伙伴。
2. AbMole蛋白酶抑制劑Cocktail（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）：全方位守護蛋白完整性
AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）是一款含有多款抑制劑的復(fù)合物，它包含了多種高效、特異性的蛋白酶抑制劑，由AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Bestatin、E-64、Pepstatin-A等6種不同的蛋白酶抑制劑優(yōu)化配比配置而成，相較于傳統(tǒng)的由單一組分構(gòu)成的蛋白酶抑制劑如PMSF，能夠更加廣泛地抑制絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等多種常見蛋白酶的活性。這種全方位的保護機制，從樣本提取的那一刻起，就為您的目標蛋白提供了堅實的防護。另外一方面，PMSF具有一定的毒性和腐蝕性且半衰期較短。而AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）則具有低毒和較強的穩(wěn)定性，可有效解決大家使用PMSF時的擔(dān)憂。
AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）除了用于WB實驗以外，還能為免疫共沉淀 (Co-IP)、pull-down、免疫沉淀 (IP)、免疫組織化學(xué) (IHC)、免疫熒光 (IF)、酶學(xué)研究等多種實驗中的蛋白提供保護。
圖1. AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）可有效保護目的蛋白不受蛋白酶的降解。
3.成功案例
案例1. 研究人員利用WB實驗、代謝組學(xué)分析等技術(shù)篩選與PDAC肝轉(zhuǎn)移有關(guān)的關(guān)鍵代謝物。實驗中使用了來自AbMole的兩個爆款產(chǎn)品，即蛋白酶抑制劑Cocktail （M5293）和磷酸酶抑制劑Cocktail（M7528）對蛋白進行保護，兩款抑制劑有效避免了蛋白的降解并保護蛋白的磷酸化狀態(tài)。
圖2. 使用來自AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為WB實驗提供保護
案例2. 研究人員發(fā)現(xiàn)FDFT1在肝細胞癌（HCC）中的表達與膽固醇和膽汁酸水平的變化相關(guān)，并通過HNF4A/ALDOB/AKT1軸影響HCC的進展。在研究FDFT1的功能時，實驗人員使用來自AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為動物組織的蛋白提取提供保護。
圖3. AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為動物組織WB實驗中的蛋白提供保護。
案例3. 科研人員研究了miR-30a-5p/CLCF1軸在肝細胞癌（HCC）中的Sorafenib耐受性和有氧糖酵解中的作用。在驗證CLCF1的敲低以及對下游信號蛋白的影響時，實驗人員使用了AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail（Protease Inhibitor Cocktail，M5293）為蛋白提供保護。
圖4. 由AbMole提供的蛋白酶抑制劑Cocktail（M5293）為WB實驗提供保護，以驗證CLCF1的敲低。
AbMole多年來持續(xù)聚焦生命科學(xué)研究和新藥研發(fā)最新動態(tài)，為全球科研客戶提供高純度、高生物活性的各類小分子抑制劑、細胞因子、天然產(chǎn)物、抗生素和人源化單抗等試劑。
參考文獻及鳴謝
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