貼壁細胞不同狀態(tài)下消化培養(yǎng)技巧全攻略

細胞生長特性分為兩種，一種是貼壁一種是懸浮，不同的細胞形態(tài)對應(yīng)的操作方法也大有不同，今天我們主要講解一下貼壁細胞的相關(guān)培養(yǎng)技巧。
 

在操作貼壁細胞的過程中，消化環(huán)節(jié)確實至關(guān)重要。消化時間的長短需要根據(jù)每個細胞的狀態(tài)進行精確調(diào)整，以確保細胞的健康和完整性。消化過度或消化不充分都可能對細胞造成不可逆的影響，因此，了解并準(zhǔn)確判斷貼壁細胞的狀態(tài)對于確定消化時間至關(guān)重要。
 

貼壁細胞狀態(tài)，分為以下幾種：

1，疏松貼壁細胞

細胞傳代密度控制在80%左右最少不能低于60%，消化時間控制在1-2分鐘左右，傳代后48小時內(nèi)不要動該細胞，讓其慢慢貼壁，需要觀察時也要輕拿輕放。
 

如果在液體中還存在未貼壁的細胞，可以在下次換液時通過離心收集這些細胞。這樣既能保證細胞的充分利用，又能避免未貼壁細胞對實驗結(jié)果的干擾。
 

2，容易分化的細胞

需使用較好的血清培養(yǎng)，盡量讓細胞生長密度高一些，消化時觀察細胞的形態(tài)變化，變圓后及時終止消化處理。
 

減少吹打次數(shù)，避免不必要的機械損傷；輕柔吹打，避免氣泡產(chǎn)生，細胞呈單個狀態(tài)即可。

3，生長緩慢的細胞

如果細胞突然生長緩慢，需考慮是否是試劑的批次問題，細胞污染等可能性。如果本身細胞生長較慢，需使用較好的血清培養(yǎng)，必要時可加大血清濃度（5%-10%左右），傳代時密度需在80%以上，密度太稀傳代會直接影響細胞的生長周期及狀態(tài)，傳代比例控制在1:2或1:3。

4，聚團成長的細胞

聚團成長的細胞不容易生長滿，在長到70%-80%左右就可以傳代，消化時觀察細胞的形態(tài)變化，細胞變圓并有少量細胞脫落即可終止消化，較難消化的細胞，可以分次消化，相對增加消化時間。
 

胰酶作為細胞貼壁工藝中的關(guān)鍵物料之一，酶活性、有無動物源等因素均至關(guān)重要。逐典TryPLUS消化液作為體外重組表達的胰酶類似物，與傳統(tǒng)胰酶的消化動力學(xué)相似，但區(qū)別與傳統(tǒng)胰酶，具有純度高，細胞毒性低，細胞消化溫和等特點，產(chǎn)品無動物源性，無需胰酶抑制劑，稀釋即可進行終止，并且能夠兼容多種細胞培養(yǎng)體系，定能成為您細胞培養(yǎng)工藝中的絕佳幫手！
 

逐典TrypLUS消化液優(yōu)勢

1. DMF備案

2. 非動物來源

3. 室溫貯存，無需胰酶抑制劑，稀釋即可終止

4. 消化溫和，消化后細胞活性高

5. 即開即用，方便快捷

逐典TrypLUS消化液應(yīng)用案例