內毒素的檢測之鱟試驗法的介紹與應用

內毒素為革蘭氏陰性細菌及其它一些微生物如衣原體、立克次氏體、螺旋體、單核細胞增多李斯特菌等胞壁中的類脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)成分。內毒素對機體有極為廣泛的作用，可影響到機體幾乎每一個器官、系統(tǒng)及生物功能。內毒素對機體有多種毒害作用，如熱原性，致死作用，白細胞減少及增多，斯氏反應，彌漫性血管內凝血(DIC)，骨髓壞死，胚胎骨質耗損，血壓下降，血小板凝聚，補體激活，Hageman因子激活，誘導血漿原激活劑，促進前列腺素的合或，抑制糖原異生的關鍵酶，骨骼肌加速釋放氨基酸等等。因此，臨床上革蘭氏陰性菌感染或膿毒癥時，如并發(fā)毒血癥和內毒素休克，可有許多病理現象出現。最終可因心、腎、肺、肝等功能的衰竭而發(fā)生死亡。

由于很小劑量的內毒素即能引起極廣泛的生物作用及病理作用，因此，加強對內毒素檢測的研究，便成為臨床、公共衛(wèi)生、藥檢系統(tǒng)等領域的重要課題之一。在臨床上，加強對革蘭氏陰性菌感染或革蘭氏陰性菌菌血癥、膿毒癥時血清中內毒素檢測，有利于及時發(fā)現內毒素休克的發(fā)生，以迅速采取果斷的治療。在公共衛(wèi)生及藥檢系統(tǒng)等方面，對水源、食品、飲料、各種藥物及生物制品進行內毒素檢測，可嚴格控制水源水、食品、飲料、各種藥物、生物制品中的內毒素含量，以將其控制在可接受的法定水平以下，有利于保證人民的身體健康。
 

鱟試驗法
LT法又稱鱟變形細胞溶解物試驗（Limulus amoebocyte lysate，LAL），是目前檢測內毒素最敏感的方法。它比RT法敏感10～100倍以上，可測出微量的內毒素(0.01～1 ng/m1 ) ，用微量光電法及其它的改進方法可測到微微克（Pg/ml）的水平。而在RT法中敏感性高的家兔需注射1.5ng/kg才能引起發(fā)熱，而敏感性低的卻需注射0.5-10ug/ kg才能引起發(fā)熱。

LT法可廣泛地用于革蘭氏陰性菌感染的快速診斷，對患者的血液、尿液及腦脊液可進行直接的檢查。此法亦可用于檢查各種注射劑內是否有內毒素污染。近十多年來，隨著各種先進的手段（如同位素標記技術，新頻光電技術、免疫電泳技術等）應用于LT領域，使LT法得到了許多改進，敏感性又日益提高。

總之，從目前來看，LT法為檢測內毒素的最好方法。其主要優(yōu)點就是敏感性高，假陽性少，耗費的試劑量少，且設備簡單，實驗時間短，適用于臨床、衛(wèi)生事業(yè)及藥檢系統(tǒng)大規(guī)模地進行。如能解決好鱟試劑、內毒素及操作程序的標化問題，則LT法將是檢測內毒素的最好方法。