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PolyFast Transfection Reagent在細胞轉染實驗的應用

瀏覽次數:1403 發(fā)布日期:2022-3-10  來源:MedChemExpress
 

小 M 敲黑板!朋友們,是不是忘了年前我們分享的實驗寶典了!不都告訴你們細胞轉染的一大法寶了嗎!趕緊搬好小板凳跟著我一起復習一下。

 

細胞轉染實驗是生物學實驗中較為基礎的實驗,主要指將 DNA/RNA 導入真核細胞。細胞轉染方法五花八門,常見的可分為化學法、物理法和病毒法。

 

先前小 M 已經介紹過各種轉染方法的優(yōu)缺點了 (見 “六合心法” 有三式~),在傳統(tǒng)的轉染方法 (如磷酸鈣法、電穿孔法、病毒法等) 轉染效率低、細胞毒性大、重復性差的情況下,以 Lipo3000 為主的陽離子脂質體轉染試劑脫穎而出,一度成為轉染界的“熱門選手”。但是它貴啊!稍一不慎,人財兩空,哦不,是細胞和試劑都沒了,豈是一個慘字了得。

 

圖 1. 常見轉染技術原理

 

想要高效又價美的轉染試劑嗎?

 

MCE 重磅推出的性價比之王 PolyFast Transfection Reagent(HY-K1014),宿主范圍廣、轉染效率高、細胞毒性小,最最最關鍵的是價格只有 Lipo3000 五分之一。!Lipo3000 五分之一!!Lipo3000 五分之一。。嘿嘿,重要的事情說三遍。

 

圖 2. 細胞轉染步驟

 

 
 
 小白: PolyFast Transfection Reagent 也是屬于陽離子脂質體轉染試劑嗎?
 小M: 不是哦!PolyFast Transfection Reagent 屬于陽離子聚合物轉染試劑,在確保高轉染效率的同時,對細胞毒性更!

 小白: 那可以使用有血清的培養(yǎng)基嗎?

 小M: 可以使用有血清的培養(yǎng)基。但對于一些難轉染細胞,建議剛開始轉染前使用無血清培養(yǎng)基,至少轉染一小時后再換成有血清培養(yǎng)基。

 小白: 那培養(yǎng)基中含有抗生素會對細胞轉染有影響嗎?

 小M: 可添加抗生素。但是為了提高轉染效率,建議剛開始轉染前使用無抗生素培養(yǎng)基,后續(xù)可根據具體的實驗體系添加相應抗生素。

 小白: 那在具體的操作過程中,DNA 和 PolyFast Transfection Reagent 的比例是多少呢?

 小M: 我們推薦的 DNA (μg) 和 PolyFast Transfection Reagent (μL) 的用量比例為 1:3。如有必要,可在 1:1-1:5 的范圍內調整以優(yōu)化轉染效果。最佳轉染條件因不同的細胞類型和培養(yǎng)條件而有所區(qū)別,轉染前,可做預實驗摸索最佳轉染比例。

 小M: 此外,除了轉染質粒 DNA,我們的轉染試劑也適用于 RNA 轉染~

 小白: 那可以同時轉染兩個質粒嗎?

 小M: 當然也可以啦!共轉的話,建議總 DNA 及 PolyFast Transfection Reagent 的用量同步提高兩倍,再根據具體的實驗結果摸索兩個質粒的使用比例。

 小M: 就是如此優(yōu)秀,小 M 帶大家一起來看下我們的測試數據吧。
 
 
宿主范圍廣
 
 

MCE PolyFast Transfection Reagent 對多種常見細胞具有高水平轉染效率,也可轉染一些原代細胞和難轉染細胞。

 

下表列舉了本產品適用的部分細胞系。

 

圖 3. 適用細胞系

 

轉染效率高
 
 

圖 4. HEK293 細胞中和 BHK-21 細胞中轉染效率比較

 

細胞毒性小
 

圖 5. 轉染效率比較和細胞活力測定

左:293 T 細胞,pcDNA3-C-REP 質粒 (2.5 μg);PolyFast Transfection Reagent (7.5 μL);右:Huh-7 細胞活力測定

 

 
看了這么多,是不是心動啦?有了 MCE PolyFast Transfection Reagent,老板再也不用擔心我做不好細胞轉染實驗啦!
發(fā)布者:上海皓元生物醫(yī)藥科技有限公司
聯(lián)系電話:021-58955995
E-mail:sales@medchemexpress.cn

標簽: 轉染
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