人免疫球蛋白輕鏈ELISA試劑盒幾項具體 操作步驟

人免疫球蛋白輕鏈lambda（λ-IgLC）ELISA試劑盒 操作步驟 
    .標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 
    8 ng/L5號標準品50μl的原倍標準品加入50μl標準品稀釋液 
    4 ng/L4號標準品50μl的5號標準品加入50μl標準品稀釋液 
    2 ng/L3號標準品50μl的4號標準品加入50μl標準品稀釋液 
    ng/L2號標準品50μl的3號標準品加入50μl標準品稀釋液 
    0.5 ng/L號標準品50μl的2號標準品加入50μl標準品稀釋液 
    2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 
    3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
    4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用 
    5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 
    6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 
    7.溫育：操作同3。 
    8.洗滌：操作同5。 
    9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘. 
    0.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。 
    .測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。