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凍存細胞時,還在堅持緩凍原則嗎?

瀏覽次數(shù):7955 發(fā)布日期:2019-3-28  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
一、我們先來說說何為緩凍:
       緩凍即為凍存細胞時,要程序降溫——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 過夜,次日投入液氮內(nèi)。
二、那為什么要進行緩凍呢?
       其實所謂的緩凍是一般使用傳統(tǒng)凍存液凍存過程中需要程序降溫。
       傳統(tǒng)的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO及基礎培養(yǎng)基等組分組成。凍存保護的DMSO組分,在進入細胞后結(jié)合細胞內(nèi)部的水份,降低冰點,防止細胞在冷凍過程中形成冰晶對細胞造成損害。
       但是DMSO只能在細胞內(nèi)部保護細胞,細胞外部沒有保護,水結(jié)冰晶會在細胞膜外部受到損傷,為了防止冰晶過大,使用時必須采用程序降溫的方式,才可保證細胞復蘇的成功率(80%以上)。
       若不采用程序降溫的形式,有些凍存的細胞,甚至復蘇成功率為0。

三、無血清細胞凍存液幫您輕松凍細胞!


       無血清細胞凍存液,為多種保護劑組合,在細胞內(nèi)外進行雙重保護,大大提高了細胞復蘇存活率。無血清細胞凍存液,含多種保護劑成分。
       一些保護劑,易于穿透細胞,避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細胞外的水分子,降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進入細胞的數(shù)量,我公司無血清細胞凍存液,為多種保護劑組合,在細胞內(nèi)外進行雙重保護,大大提高了細胞復蘇存活率。


附:
1.傳統(tǒng)細胞凍存液與無血清細胞凍存液使用方法對比
使用步驟 傳統(tǒng)凍存液 無血清凍存液
產(chǎn)品保存條件 分裝成小管,-20度(避免反復凍融 2-8度保存,無需分裝
凍存過程 程序降溫(4度30min, -20度1h ,-80度過夜,次日投入液氮內(nèi)) 直投-80度冰箱過夜,次日入液氮
復蘇過程 快復蘇,加新鮮培養(yǎng)液,離心取出保護液 快復蘇,加新鮮培養(yǎng)液,離心取出保護液

 

2.凍存后細胞復蘇數(shù)據(jù)對比

細胞系名稱

傳統(tǒng)凍存液

YOCON凍存液

A549(肺癌)

85%

95%

MDCK(犬腎細胞)

90%

95%

3T3(小鼠胚胎成纖維細胞)

90%

93%

hepG2(肝癌細胞)

86%

93%

MK2 (恒河猴腎細胞)

88%

95%

雜交瘤細胞

80%

90%

MSC(間充質(zhì)干細胞)

80%

95%

單個核細胞(原代分離)

50%

90%

 
發(fā)布者:友康恒業(yè)生物科技(北京)有限公司
聯(lián)系電話:010-58711655
E-mail:liangjunqiang@yocon.com.cn

標簽: 細胞凍存
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