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DNP-BSA(2,4-二硝基苯偶聯(lián)牛血清白蛋白)在免疫學(xué)研究與檢測(cè)中的作用

瀏覽次數(shù)：220　發(fā)布日期：2025-4-25　來(lái)源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

DNP-BSA（2,4-二硝基苯偶聯(lián)牛血清白蛋白）是一種經(jīng)典的半抗原-載體蛋白復(fù)合物。DNP（2,4-二硝基苯基）作為一個(gè)小分子半抗原，本身無(wú)法單獨(dú)誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，但當(dāng)它與大分子的牛血清白蛋白（BSA）結(jié)合后，便成為了一個(gè)完整的免疫原，能夠高效激活免疫系統(tǒng)，誘導(dǎo)產(chǎn)生針對(duì) DNP 的特異性抗體。AbMole的DNP-BSA（2,4-Dinitrophenyl-Bovine Serum Albumin，M58157）作為一種重要的免疫學(xué)工具，在很多領(lǐng)域中都有著重要的作用。AbMole為全球科研客戶提供高純度、高生物活性的抑制劑、細(xì)胞因子、人源單抗、天然產(chǎn)物、熒光染料、多肽、靶點(diǎn)蛋白、化合物庫(kù)、抗生素等試劑，全球大量文獻(xiàn)專利引用。

一、作為免疫原制備抗體

DNP-BSA（M58157，AbMole）常被用作免疫動(dòng)物的免疫原，以制備抗 DNP 的特異性抗體。通過(guò)將 DNP-BSA 注射到動(dòng)物體內(nèi)，激活動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，使其產(chǎn)生針對(duì) DNP 的 B 淋巴細(xì)胞和 T 淋巴細(xì)胞，進(jìn)而分泌出特異性的抗體。這些抗體可以用于后續(xù)的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，例如檢測(cè)抗原抗體反應(yīng)、研究抗體的特異性和親和力等。

二、動(dòng)物過(guò)敏反應(yīng)造模劑

DNP-BSA（2,4-二硝基苯基-牛血清白蛋白）（M58157，AbMole）是一種常用的過(guò)敏反應(yīng)抗原，可用于誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)以及構(gòu)建動(dòng)物過(guò)敏模型�？赏ㄟ^(guò)注射DNP-BSA作為抗原誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生IgE抗體，或者直接注射抗DNP的IgE抗體等兩種不同的方式使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入致敏狀態(tài)。然后在一定時(shí)間后，通過(guò)靜脈注射DNP-BSA進(jìn)行抗原挑戰(zhàn)，以誘導(dǎo)過(guò)敏反應(yīng)�？赏ㄟ^(guò)檢測(cè)體溫變化、血清中炎癥介質(zhì)水平、以及通過(guò)切片觀察組織中肥大細(xì)胞的脫顆粒情況和炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)情況等方法判斷過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生。

圖1. 利用抗DNP的IgE和DNP-BSA處理小鼠構(gòu)建過(guò)敏模型[1]

三、免疫耐受研究

DNP-BSA（M58157，AbMole）既可以作為免疫原誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，也可以用于研究免疫耐受的機(jī)制。通過(guò)不同途徑（如皮下注射、腹腔注射、口服等）給動(dòng)物注射DNP-BSA，可以誘導(dǎo)不同程度的免疫耐受。低劑量的DNP-BSA可以通過(guò)口服或皮下注射的方式誘導(dǎo)免疫耐受。這種耐受通常是通過(guò)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）的作用實(shí)現(xiàn)的。Tregs可以分泌抑制性細(xì)胞因子（如IL-10和TGF-β），從而抑制效應(yīng)T細(xì)胞的活化和增殖[2]。高劑量的DNP-BSA可以通過(guò)靜脈注射的方式誘導(dǎo)免疫耐受。這種耐受通常是通過(guò)克隆無(wú)能（clonal anergy）實(shí)現(xiàn)的[3]。克隆無(wú)能是指T細(xì)胞或B細(xì)胞在抗原刺激下無(wú)法被充分激活，從而無(wú)法產(chǎn)生有效的免疫反應(yīng)。2014年，AbMole的兩款抑制劑分別被西班牙國(guó)家心血管研究中心和美國(guó)哥倫比亞大學(xué)用于動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，相關(guān)科研成果發(fā)表于頂刊 Nature 和 Nature Medicine。

四、免疫檢測(cè)和免疫層析

免疫層析技術(shù)是一種基于抗原抗體特異性反應(yīng)的膜檢測(cè)方法。它以硝酸纖維素膜為固定相，該膜上固定有檢測(cè)線（包被抗體或抗原）。測(cè)試液作為流動(dòng)相，而熒光或膠體金標(biāo)記的抗體或抗原則固定在玻璃纖維材質(zhì)的結(jié)合墊上。通過(guò)毛細(xì)管作用，待測(cè)物在層析條上移動(dòng)。在流動(dòng)相的作用下，待測(cè)物首先與熒光標(biāo)記的抗體或抗原結(jié)合，隨后在到達(dá)檢測(cè)線時(shí)與包被的抗體或抗原結(jié)合，形成熒光或膠體金條帶，從而實(shí)現(xiàn)檢測(cè)目的。然而，在生產(chǎn)、儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中，現(xiàn)有的免疫層析檢測(cè)試紙條可能出現(xiàn)問(wèn)題，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陰性。為避免假陰性結(jié)果，通常在硝酸纖維素膜上設(shè)置一條質(zhì)控線（C線）。常見(jiàn)的質(zhì)控線系統(tǒng)包括羊抗鼠多克隆抗體系統(tǒng)、雞IgY/羊抗雞IgY系統(tǒng)等。近年來(lái)，DNP-BSA作為一種新興的質(zhì)控線系統(tǒng)受到關(guān)注。由于2,4-二硝基苯酚（DNP）是動(dòng)植物體內(nèi)不存在的小分子化合物，DNP-BSA系統(tǒng)利用抗DNP的抗體和DNP-BSA構(gòu)建質(zhì)控線，展現(xiàn)出良好的穩(wěn)定性和低干擾性。DNP-BSA（2,4-二硝基苯偶聯(lián)牛血清白蛋白，M58157，AbMole）可滿足免疫層析中的膠體金檢測(cè)或免疫熒光檢測(cè)，目前是很多免疫層析產(chǎn)品（抗原檢測(cè)、病毒檢測(cè)）中重要的質(zhì)控系統(tǒng)。

圖2. 免疫層析的一般原理圖

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參考文獻(xiàn)：

[1] GUO X, LEI Y, XU Y, et al. PRL2 negatively regulates FcεRI mediated activation of mast cells [J]. Cell death & disease, 2025, 16(1).

[2] MAJEWSKA-SZCZEPANIK M, ZEMELKA-WIĄCEK M, PTAK W, et al. Epicutaneous immunization with DNP-BSA induces CD4+ CD25+ Treg cells that inhibit Tc1-mediated CS [J]. Immunology and cell biology, 2012, 90(8): 784-95.

[3] PAUL W E, THORBECKE G J, SISKIND G W, et al. The effect of dose in tolerance induction on the subsequent response to a cross-reactive antigen [J]. Immunology, 1969, 17(1): 85-92.

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