碘標記抗體-藥物偶聯(lián)PET探針用于無創(chuàng)監(jiān)測尿路上皮癌中Nectin-4的表達

文獻信息
貴州大學醫(yī)學院、北京大學腫瘤醫(yī)院暨北京市腫瘤防治研究所，核醫(yī)學科，國家藥監(jiān)局放射性藥物研究與評價重點實驗室，惡性腫瘤發(fā)病機制及轉(zhuǎn)化研究教育部重點實驗室等團隊合作的研究成果An iodine‑labelled Antibody–drug conjugate PET probe for noninvasive monitoring of Nectin-4 expression in urothelial carcinoma(碘標記抗體-藥物偶聯(lián)PET探針用于無創(chuàng)監(jiān)測尿路上皮癌中Nectin-4的表達)在學術(shù)期刊《International Journal of Pharmaceutics》(JCR Q1, SCI IF 5.8)發(fā)表。平生公司的小動物PET/CT(型號：Super Nova)產(chǎn)品在論文中提供了重要的腫瘤小鼠PET/CT圖像和定量分析。

 該研究的通訊作者為北腫楊志主任，朱華研究員。第一作者為任亞楠博士、劉特立副研究員以及李思明副主任醫(yī)師。

文獻背景
背景與目的:一些對Nectin-4具有高親和力的抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC)在膀胱癌三線治療中取得了突破性進展。然而，由于腫瘤的異質(zhì)性，許多患者仍然難以從治療中獲益。治療可視化作為最先進的輔助治療技術(shù)，可以最直觀地預測藥物治療的有效性，及時發(fā)現(xiàn)耐藥的發(fā)生。其中，核醫(yī)學分子探針在該領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。

方法:以N-溴琥珀酰亞胺為氧化劑，以Na^124/125I標記臨床廣泛應用的ADC藥物Enfortumad Vedetin(EV)，制備^124/125I-EV。放射化學純度采用放射薄層色譜法分析，生物活性采用酶聯(lián)免疫吸附法測定。通過細胞攝取實驗和小動物PET成像驗證其特異性和靶向性。

關(guān)鍵結(jié)果:制備的^124/125I-EV具有較高的標記率和放射化學純度。酶聯(lián)免疫吸附試驗表明，¹²⁴I-EV在SW780細胞(Nectin-4陽性，8h時4.05±0.32% IA/5×105細胞)中的吸收明顯高于T24細胞(Nectin-4陰性，1.34±0.18% IA/5×105細胞，p<0.001)。PET成像顯示，¹²⁴I-EV在SW780腫瘤中的積累量明顯高于T24腫瘤，與冷EV共注射可特異性阻斷SW780腫瘤的攝取。腫瘤部位的信噪比隨時間逐漸增加，在72h達到峰值。

結(jié)論與意義:成功制備了¹²⁴I-EV，具有高特異性和與Nectin-4的結(jié)合親和力。這種放射性探針完全模擬了ADC藥物的內(nèi)循環(huán)和腫瘤的攝取和滯留，將極大地提高ADC治療的臨床應用。

實驗方法
微PET/CT成像
在Super Nova PET/CT(平生醫(yī)療科技有限公司)上進行小動物PET研究。將¹²⁴I-EV (5.55 MBq)200μL經(jīng)尾靜脈注射到健康小鼠、SW780和T24荷瘤小鼠體內(nèi)。為了阻斷，給攜帶SW780腫瘤的小鼠共注射500μg EV。2.5%(v/v)異氟醚麻醉小鼠后，分別于注射后2h、24h、48h和72h(p.i)進行15min的微PET/CT成像。使用Avatar軟件對圖像進行分析。3D-OSME+PSF算法重建CT-AC PET后，人工繪制感興趣區(qū)域(ROI)，勾勒出腎臟、心臟、肝臟、腫瘤和肌肉的輪廓，然后計算不同時間點腫瘤與非靶器官的比例。

實驗結(jié)果
在SW780和T24異種移植腫瘤模型中，¹²⁴I-EV也在p.i. 2h時在心臟(SW780腫瘤模型的SUVmax為3.97±0.09,T24腫瘤模型的SUVmax為3.07±0.01)和肝臟(SW780腫瘤模型的SUVmax為2.92±0.02,T24腫瘤模型的SUVmax為1.77±0.02)中大量積累，并隨著時間的推移逐漸通過肝臟排出，這與正常小鼠的結(jié)果一致(圖4A-D)。

圖4 異種腫瘤模型的小動物PET圖像和成像分析。¹²⁴I-EV在未阻斷(A)、阻斷(B)和T24異種移植模型(C)的2h、24h、48h和72h的最大強度投影(MIP)圖像和SUVmax值。白色和紅色箭頭分別表示SW780和T24腫瘤。阻斷=500μg冷EV前體。(D)不同組肝臟、肌肉、腎臟、心臟和腫瘤按ROI在2h、24h、48h和72h的SUVmax值比較。(E)按ROI計算的腫瘤與器官比值。阻斷=500μg冷EV前體。

文獻結(jié)論
總之，作者開發(fā)了一種新的碘標記ADC PET探針。臨床前研究表明，該藥物在體外具有良好的Nectin-4特異性和親和力，并且在體內(nèi)具有較高的靶向吸收能力。這將是動態(tài)監(jiān)測Nectin-4表達和篩選可能受益于EV治療的患者的一種有前途的方法。

使用設備

 
  Super Nova^® Micro PET/CT（III 代外觀圖）