EnSight多功能酶標(biāo)儀的優(yōu)勢(shì)

工欲善其事必先利其器，生物制藥從前期藥物靶點(diǎn)確認(rèn)，高通量篩選，藥物優(yōu)化，活性功能分析，工藝開發(fā)，直至質(zhì)量控制都離不開酶標(biāo)儀這一檢測(cè)工具。一款優(yōu)秀的酶標(biāo)儀，在靈敏度，穩(wěn)定性，功能多樣性幾個(gè)維度如何平衡和把握呢？

 

酶標(biāo)儀最常規(guī)的功能包含光吸收，熒光和化學(xué)發(fā)光，這三種應(yīng)用能夠滿足比較基礎(chǔ)的檢測(cè)需求。但它們?cè)谠�理上有著迥異的差別：光吸收是基于光通過物質(zhì)時(shí)被吸收的定律進(jìn)行定性和定量分析；熒光是熒光分子中處于激發(fā)態(tài)的原子核外電子由高能級(jí)回到低能級(jí)所產(chǎn)生的輻射；化學(xué)發(fā)光的檢測(cè)信號(hào)是酶促反應(yīng)過程中釋放的光子，不需要激發(fā)光。因此，若想獲取比較好的檢測(cè)結(jié)果，三種功能模塊的檢測(cè)器需要獨(dú)立才是，尤其是化學(xué)發(fā)光，需要獨(dú)立于熒光之外的超敏感檢測(cè)模式，放大檢測(cè)光子信號(hào)、減少空間串?dāng)_，才能在實(shí)驗(yàn)中得到更好的檢測(cè)窗口。

 

 

質(zhì)的飛躍——EnSight超敏化學(xué)發(fā)光

EnSight這款多模式檢測(cè)儀最初的設(shè)計(jì)理念就是模塊化的光路設(shè)計(jì)，不同且獨(dú)立的檢測(cè)器滿足不同應(yīng)用需求。采用專用超敏感化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器以及免光纖的光路，在檢測(cè)時(shí)更靠近檢測(cè)樣品，有效避免相鄰樣本的交叉干擾，也更易于捕捉微弱信號(hào)，有效區(qū)分背景干擾和樣品信號(hào)，相對(duì)普通化學(xué)發(fā)光，靈敏度提升10倍，孔間串?dāng)_低0.05%，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠和準(zhǔn)確。

 

EnSight超敏化學(xué)發(fā)光檢測(cè)光路以及與一般化學(xué)發(fā)光的比較

 

2020年，中國(guó)食品藥品檢定研究院（簡(jiǎn)稱中檢院）王佑春團(tuán)隊(duì)在EmergingMicrobes &Infections上發(fā)表了重要論文，本文作者開發(fā)了SARS-CoV-2抗病毒檢測(cè)的PBNA(pseudovirus-based neutralization assays)評(píng)價(jià)方法。首先作者構(gòu)建并滴定SARS-CoV-2假病毒；接著對(duì)SARS-CoV-2 PBNA體系進(jìn)行了優(yōu)化；最終將此PBNA體系可作為疫苗對(duì)抑制SARS-CoV-2侵入效果和靶向病毒入侵治療方案的評(píng)價(jià)方法。

 

作者全程借助EnSight和Britelite底物進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測(cè)：

• SARS-CoV-2假病毒構(gòu)建和滴度檢測(cè)
• SARS-CoV-2中和反應(yīng)檢測(cè)方法的建立和驗(yàn)證

 

基于整個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)的高靈敏度和穩(wěn)定性，該方法作為標(biāo)準(zhǔn)SOP下發(fā)各省疾控，同時(shí)提供給新冠疫苗和治療藥物開發(fā)機(jī)構(gòu)，以評(píng)估候選疫苗或藥物的療效。

 

SARS-CoV-2 PBNA驗(yàn)證和工作流程

 

除了基礎(chǔ)的三功能，要實(shí)現(xiàn)更多的檢測(cè)應(yīng)用，尤其是藥物研發(fā)階段，具有多功能或可擴(kuò)展性的酶標(biāo)儀是更好的選擇。

 

EnSight除具有基本功能高精度四光柵（光吸收、熒光）模塊和超靈敏獨(dú)立化學(xué)發(fā)光檢測(cè)以外，還可擴(kuò)展超靈敏度Alpha檢測(cè)功能以及高靈敏時(shí)間分辨熒光&高兼容性TR-FRET。

 

Alpha,讓最費(fèi)時(shí)耗力的ELISA得以解放

說起ELISA，可謂是免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)，但是做過的小伙伴都知道，過程“耗時(shí)耗力”，加樣，甩板子，洗滌，反復(fù)循環(huán)，一次實(shí)驗(yàn)耗費(fèi)大半天時(shí)間。那么，到底怎樣才能實(shí)現(xiàn)靈敏度又高，流程又短，省時(shí)省力的目標(biāo)蛋白檢測(cè)呢？

 

只需混合無需洗滌的ELISA——Alpha提供解決方案。和ELISA相比，Alpha是為均相檢測(cè)，操作十分簡(jiǎn)便�？墒∪ベM(fèi)時(shí)費(fèi)力的清洗步驟，無論是總的實(shí)驗(yàn)操作時(shí)間，還是試劑準(zhǔn)備時(shí)間都被大大縮短。

 

 

Alpha檢測(cè)須配置高強(qiáng)度的激光光源，以激發(fā)出供體微珠上足量的單體氧分子。EnSight超靈敏HTS Alpha模塊在配置激光光源和超靈敏PMT的基礎(chǔ)上，又對(duì)光源和PMT進(jìn)行了優(yōu)化，因此其信噪比更高、檢測(cè)速度更快，得到低背景、高靈敏度的信號(hào)。再者，易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化分液操作，非常適合高通量篩選。

 

 

技多不壓身——時(shí)間分辨熒光(TRF)

稀土元素在受到熒光激發(fā)時(shí)，發(fā)生熒光衰減的周期通常是很長(zhǎng)，能達(dá)到1-2ms，可以滿足測(cè)量要求，因此而產(chǎn)生了時(shí)間分辨熒光分析法，即使用長(zhǎng)效熒光標(biāo)記物，在關(guān)閉激發(fā)光后再測(cè)定熒光強(qiáng)度的分析方法。TRF光信號(hào)比普通熒光信號(hào)較弱，EnSight采用優(yōu)化的濾光片及專用二向色鏡光路，以盡量保證激發(fā)光強(qiáng)度、光透過率及雜信號(hào)干擾，以達(dá)到更好的檢測(cè)靈敏度和信噪比。

 

EnSight還是一臺(tái)細(xì)胞成像分析儀

酶標(biāo)儀一般是通過讀取光強(qiáng)度值這一單一維度來評(píng)估樣品信息，但細(xì)胞類檢測(cè)對(duì)數(shù)據(jù)的更高要求，如細(xì)胞數(shù)量、生長(zhǎng)融合度、細(xì)胞形態(tài)和增殖、凋亡水平、病毒空斑實(shí)驗(yàn)等。EnSight十八般武藝，樣樣精通。

 

EnSight具有高速高效細(xì)胞成像模塊，采用先進(jìn)的sCMOS相機(jī)以降低信號(hào)背景噪音，激光自動(dòng)聚焦以快速成像，固態(tài)光源(LED)以進(jìn)行短時(shí)照明。可以依次進(jìn)行多通道檢測(cè)，一整個(gè)384孔板整板生成單色圖像只需大約5分鐘。相比人工計(jì)數(shù)和分析，可以顯著提高實(shí)驗(yàn)通量以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。

 

EnSight 多模式檢測(cè)儀進(jìn)行成像和空斑計(jì)數(shù)分析

 

 

人工計(jì)數(shù)和EnSight計(jì)數(shù)的比較

 

如虎添翼——智能分析軟件

出色的酶標(biāo)檢測(cè)結(jié)果，離不開硬件全程保駕護(hù)航，同時(shí)更需要一個(gè)好的軍師——分析軟件。

 

EnSight基于工作流程的Kaleido數(shù)據(jù)采集和分析軟件方便易學(xué)，其用戶界面會(huì)引導(dǎo)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，更加輕松自如地設(shè)置和運(yùn)行多技術(shù)流程。用戶可根據(jù)自己的技能水平和熟練程度設(shè)置實(shí)驗(yàn)方案。預(yù)制的方案有助于更快啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)，非常適合新手和日常應(yīng)用。利用該軟件的任務(wù)工具箱，可以將任務(wù)結(jié)合起來創(chuàng)建自定義方案，因此可以在更廣泛的成像應(yīng)用中快速獲取結(jié)果。

 

集美貌與才華與一身，EnSight多功能酶標(biāo)儀以一種獨(dú)特的方式將標(biāo)記技術(shù)與微孔板顯微成像技術(shù)完美整合，為您的研究提供一種真正的正交方法，使您獲得前所未有的深入見解。