內(nèi)毒素檢測失敗的原因分析及降低失敗率的操作方法

在日常的內(nèi)毒素檢測中，我們經(jīng)常會遇到結(jié)果異�；蚴�敗, 常見為空白孔反應(yīng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線失敗和CV%值超標(biāo)。

今天我們來聊聊，針對以上這些，在日常的內(nèi)毒素檢測中，該怎么應(yīng)對？
 

1. 空白孔和陰性對照的失敗

空白孔反應(yīng)是分析方法失敗常見原因之一

● 移液過程中，避免灰塵、毛發(fā)、皮膚細(xì)胞和其他顆粒物對反應(yīng)孔造成污染
● 樣品準(zhǔn)備時，移液吸頭不應(yīng)經(jīng)過空白孔或陰性對照孔
● 制備標(biāo)準(zhǔn)品時，確保充分混勻，保證最低濃度點和空白點有濃度差
● 切勿使用可能被污染的LAL試劑水制備空白孔
● 通過使用可靠廠商的試劑耗材，進一步降低污染的可能性

 

2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線和陽性對照的失敗

這類實驗的失敗通常是與實驗人員和移液過程相關(guān)
 

● 標(biāo)準(zhǔn)品制備過程中正確使用已校準(zhǔn)的移液器和匹配的吸頭
● 實驗人員需專注于標(biāo)準(zhǔn)品、樣品制備和96孔板制備過程（*非常重要）
● 添加鱟試劑時推薦使用多通道移液器降低方法變異性

 

3. “熱孔”或單孔污染

在空白、陰性對照或內(nèi)毒素含量較低的樣品孔中，常�？赡馨l(fā)生熱孔或單孔污染。通常表現(xiàn)為復(fù)孔中一個較另一個相比，有明顯的高內(nèi)毒素信號。“熱孔”確切原因尚不清楚，如果確認(rèn)多次的重新測試是由于96孔板的原因，建議更換新批次的96孔板。
 

以上所提到的情況中，大多數(shù)與人工操作有關(guān)，Lonza的PyroTecTM PRO 系統(tǒng)是一個靈活、強大和用戶友好的自動化細(xì)菌內(nèi)毒素檢測系統(tǒng)，能有效減少人工手動過程中的移液和加樣錯誤，大大降低實驗人員操作時間、提高實驗效率。
 

此外，PyroTecTM PRO系統(tǒng)樣品配置高度靈活、實驗準(zhǔn)備時間短（<10min/42樣品）、操作便利等特點。