Lonza 4d-Nucleofector X小體積轉(zhuǎn)染應(yīng)用分享

4D-Nucleofector® X Unit 是4D-Nucleofector®系統(tǒng)四個功能模塊之一，用于2 × 104到2 × 107細(xì)胞量的轉(zhuǎn)染，X模塊中不同的電極模式（電極板或電極條）可選用相同的電轉(zhuǎn)程序，系統(tǒng)可自動轉(zhuǎn)化應(yīng)用于不同模塊的參數(shù)，客戶無需進(jìn)行額外操作，實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的方便性與靈活性最大化。

4D-Nucleofector® X Unit 特點(diǎn)

1.4D Nucleofector 核轉(zhuǎn)系統(tǒng)X模塊可同時轉(zhuǎn)染2個100μL電極杯或1個16孔電極板條（每孔20μL）。

2.電極杯和電極板條可以選用相同的電轉(zhuǎn)程序。

3.每個電轉(zhuǎn)杯、每個孔可獨(dú)立設(shè)置程序。

4.操作簡單靈活。

1）20ul與100ul）使用相同的操作手冊。

2）100ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最多可達(dá)2 x 107。

3）20ul 轉(zhuǎn)染細(xì)胞數(shù)量最少到2 x 104。

5.通量多元化。

1）細(xì)胞通量的1-16個樣。

2）可預(yù)設(shè)50個以上參數(shù)，針對100ul 體系。

3）可根據(jù)您的要求選擇20ul體系減少試劑費(fèi)用支出。

6.轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞。

1）5種試劑盒可覆蓋所有原代細(xì)胞類型。

2）轉(zhuǎn)染優(yōu)化實(shí)驗(yàn)更加簡易便宜（如果您的細(xì)胞在數(shù)據(jù)庫中沒有需要自行優(yōu)化）。

應(yīng)用案例分享

一，原代小鼠和人T細(xì)胞的KO

1.小鼠和人類T細(xì)胞中CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因KO效率高達(dá)90%以上

2.各種細(xì)胞表面受體（CTLA4，PD1），TF和細(xì)胞因子的KO

3.可以以類似的效率生成雙基因KO

二，原代人T細(xì)胞的KI

1.激活2d后進(jìn)行電轉(zhuǎn)，CD3/28

2.90 g，10 min

3.Solution P3，4D 96 well unit

4.EH 115

5.one million T cells/20 μL

6.2.5 μL RNP（50 pmol）+2μL HDR（4 μg）