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Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)中的注意事項(xiàng)及指標(biāo)評(píng)價(jià)詳解

瀏覽次數(shù):1281 發(fā)布日期:2023-2-9  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

隱蔽站臺(tái)實(shí)驗(yàn)(空間位置學(xué)習(xí)階段)/Spatial acquisition

1、動(dòng)物放入Morris水迷宮(Morris water maze,MWM)時(shí)面對(duì)迷宮壁。

2、每次試驗(yàn)的時(shí)間限制標(biāo)準(zhǔn)為1 min或2 min;通常,大鼠2 min,小鼠1 min。

3、在試驗(yàn)間隔(ITI)將動(dòng)物放在平臺(tái)上。以前使用過(guò)30 s或60 s的ITI,但現(xiàn)在普遍使用15 s,并能產(chǎn)生良好的學(xué)習(xí)能力。然而,較長(zhǎng)時(shí)間的ITI通常應(yīng)用于小鼠,特別是在第一次測(cè)試階段,這可以提高學(xué)習(xí)能力。

4、動(dòng)物通常每天都要進(jìn)行多次試驗(yàn)。最常見(jiàn)的是每只動(dòng)物每天進(jìn)行4次試驗(yàn)。這是因?yàn)橛兴膫(gè)主要的起始位置,這能每天保持起始位置的平衡。幾乎沒(méi)有證據(jù)表明,每日試驗(yàn)次數(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在著巨大的敏感性差異,但有證據(jù)表明,每天進(jìn)行較少的試驗(yàn)可以提高學(xué)習(xí)能力。

5、可以讓一只動(dòng)物連續(xù)測(cè)試完四次,每次之間保留有試驗(yàn)間隔,再換下一只測(cè)試。另一種方法是一只動(dòng)物測(cè)試完試驗(yàn)1讓動(dòng)物在平臺(tái)上停留15 s,然后把它移到籠子里,再讓第二只動(dòng)物測(cè)試試驗(yàn)1,重復(fù)這個(gè)序列,直到所有動(dòng)物完成試驗(yàn)1,然后再測(cè)試試驗(yàn)2,3和4。后一種方法提高了小鼠的學(xué)習(xí)能力,但大鼠沒(méi)有可供支持的數(shù)據(jù)。

6、每天重復(fù)這些試驗(yàn),重復(fù)測(cè)試的天數(shù)取決于動(dòng)物的學(xué)習(xí)表現(xiàn)。每天4次試驗(yàn),約5-6天(20-24次試驗(yàn))通常足夠大鼠(在210厘米迷宮中)或小鼠(在122厘米迷宮中)達(dá)到穩(wěn)定表現(xiàn)。然而,如果任務(wù)變得更加困難,那么可能需要更多的測(cè)試時(shí)間來(lái)使動(dòng)物達(dá)到穩(wěn)定表現(xiàn)。相比之下,大鼠在122厘米迷宮中可能在第2天或第3天即可接近穩(wěn)定表現(xiàn)。

 

空間探索實(shí)驗(yàn)/ Reference memory: probe trial

1、將動(dòng)物放在迷宮中一個(gè)新的起始位置,面對(duì)水池壁——例如,原來(lái)平臺(tái)位置的對(duì)面(180°)。這是因?yàn)槭褂眯碌钠鹗嘉恢,可以確保其空間偏好反映了目標(biāo)位置的記憶,而不是針對(duì)特定的游泳路徑。

圖1:TMEM74敲除小鼠存在自閉樣和焦慮樣行為障礙

2、空間探索試驗(yàn)的目的是確定動(dòng)物是否記得平臺(tái)所在的位置。表征這種記憶的指標(biāo)包括原平臺(tái)象限滯留時(shí)間,原平臺(tái)穿越次數(shù),到原目標(biāo)位置的平均距離,與原目標(biāo)位置的角度(方位),第一次穿越原目標(biāo)位置的潛伏期等等。

3、空間探索試驗(yàn)應(yīng)在隱蔽站臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后至少24h再測(cè)試。

 

空間反轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)/Spatial reversal

1、如果需要進(jìn)行空間反轉(zhuǎn)測(cè)試,應(yīng)將平臺(tái)重新定位到另一個(gè)象限(通常是相反的象限),并每天進(jìn)行一組4次試驗(yàn),連續(xù)5天(同隱蔽站臺(tái)實(shí)驗(yàn))。

2、 反轉(zhuǎn)階段結(jié)束時(shí),進(jìn)行反轉(zhuǎn)空間探索試驗(yàn)(同空間探索實(shí)驗(yàn))。

表二:空間反轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)中每次試驗(yàn)的起始方位

評(píng)價(jià)指標(biāo)的考慮 

1、在MWM中,任務(wù)學(xué)習(xí)階段的表現(xiàn)主要由潛伏期(從試驗(yàn)開(kāi)始到找到平臺(tái)的時(shí)間)測(cè)量。路徑長(zhǎng)度也是廣泛使用的指標(biāo),并且有不受游泳速度影響的優(yōu)點(diǎn)。另一個(gè)有用的指標(biāo)是與平臺(tái)的累積距離。大多數(shù)視頻跟蹤程序都會(huì)生成這種度量,即每秒鐘或每幾毫秒測(cè)量一次距平臺(tái)的距離。累積距離被認(rèn)為是衡量空間學(xué)習(xí)能力的一個(gè)更好的指標(biāo)。第一角度即在試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)測(cè)量動(dòng)物相對(duì)于從入水點(diǎn)到平臺(tái)的直線的游泳角度。角度測(cè)量似乎對(duì)許多類型的實(shí)驗(yàn)處理都很敏感。根據(jù)大量研究發(fā)現(xiàn),潛伏期、路徑長(zhǎng)度和累積距離高度相關(guān),而第一角度與前三項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)性較低。其實(shí)這是合乎邏輯的,因?yàn)榍叭齻(gè)指標(biāo)都反映了整個(gè)試驗(yàn)期間的表現(xiàn),而第一角度是試驗(yàn)期間某一特定點(diǎn)(試驗(yàn)開(kāi)始時(shí))動(dòng)物表現(xiàn)的快照。

表三:Morris水迷宮中學(xué)習(xí)表現(xiàn)的四個(gè)計(jì)算機(jī)跟蹤指標(biāo)的相關(guān)系數(shù)矩陣

 

2、在空間探索實(shí)驗(yàn)中,作為記憶指標(biāo)的平臺(tái)穿越次數(shù)有一個(gè)局限性,即它的變異性較大,而且發(fā)生頻率很低,特別是當(dāng)目標(biāo)平臺(tái)較小或水池直徑較大時(shí)。此外,根據(jù)跟蹤軟件,可能會(huì)出現(xiàn)交叉欠計(jì)數(shù)(漏掉一些計(jì)數(shù))。研究發(fā)現(xiàn)到目標(biāo)位置的平均距離、目標(biāo)象限中的停留時(shí)間或路程以及第一角度比精確的平臺(tái)穿越提供了更穩(wěn)健的記憶度量。

 

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