LNCaP clone FGC細胞平衡后成團嚴重的原因及解決方案

細 胞 基 本 信 息

▲LNCaP clone FGC細胞正常生長形態(tài)照片

細胞名稱：LNCaP clone FGC(人前列腺癌細胞) 

細胞別稱：LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCAPCLONEFGC; LNCaP-ATCC

細胞貨號：SNL-356 

培養(yǎng)條件：1640+10% FBS+1% P/S 

培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%
 

細胞簡介：人前列腺癌細胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離，該患者經確診為前列腺癌轉移。LNCaP clone FGC細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節(jié)子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。LNCaP clone FGC細胞并不形成一致的單層，而是形成集落，在傳代時可以反復吹吸分散。LNCaP clone FGC細胞僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養(yǎng)基變酸。LNCaP clone FGC細胞生長極其緩慢，傳代后48小時內不應擾動。當培養(yǎng)瓶包裝運輸后，多數LNCaP clone FGC細胞從培養(yǎng)瓶底分離，懸浮在培養(yǎng)基中。
 

操 作 實 例
 

客戶提問：
LNCaP clone FGC細胞收到平衡一晚上，成團嚴重基本沒什么貼壁的怎么處理？
 

細胞在運輸過程中因溫差，震蕩，碰撞等原因可能會出現漂浮成團的現象，不用著急，T25表面消毒放入培養(yǎng)箱中平衡2-4h后按以下步驟操作即可恢復貼壁。

① 收集所有培養(yǎng)基及漂浮細胞到無菌50ml離心管，1000rpm，5min離心收集細胞沉淀。

② 取培養(yǎng)基上清到4℃保存，用于培養(yǎng)細胞，以平穩(wěn)過度到客戶自己的培養(yǎng)基。在原50ml離心管中加入5mlPBS重懸細胞沉淀，盡量吹散后1000rpm，5min離心，棄上清。

③ 加入1ml胰酶輕輕震蕩混勻，勿直接吹打細胞，然后放入培養(yǎng)箱消化2-3min，消化完成后用移液器輕輕吹打幾下，吹散細胞后立刻加5ml完培終止消化。1000rpm，5min離心，棄上清。

④ 加入1ml完培重懸細胞接種到新培養(yǎng)瓶中。T25加10-12ml培養(yǎng)基培養(yǎng)，通常2天左右換液一次，若培養(yǎng)基變黃及時換液，以維持一個相對穩(wěn)定的培養(yǎng)條件，有利于細胞活正常生長。
 

注意：

原T25剩余貼壁細胞密度大于70%，可以正常消化傳代；貼壁細胞較少可以加培養(yǎng)基正常培養(yǎng)至70%密度以上消化傳代；若幾乎沒有細胞則可以丟棄。

若出現傳代后次日貼壁較少的情況，可以收集培養(yǎng)基及漂浮細胞到離心管，離心收集未貼壁細胞，然后加新培養(yǎng)基盡量重懸吹散后接種回原培養(yǎng)瓶讓細胞繼續(xù)貼壁，注意小心操作，避免將已貼壁細胞吹下。

由于貼壁較弱細胞消化時間本身較短，必須控制消化時間和吹打力度，避免細胞消化或吹打死亡過多導致無法正常貼壁生長。
 

1.培養(yǎng)基營養(yǎng)不足以及pH值過低時會使細胞活力大幅度下降，建議加足量培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞，特別注意培養(yǎng)基變黃后要及時換液；

2.換液時注意不要直接沖擊到細胞表面以及過冷的試劑處理細胞，避免細胞回縮脫落；

3.細胞不要長時間高密度培養(yǎng)，70-80%密度左右即可傳代，以維持細胞有較好的活性；

4.不要將細胞放置室溫過久或經常挪動細胞，盡量讓細胞靜養(yǎng)。

5.細胞貼壁較弱，培養(yǎng)過程細胞通常呈聚集放射狀生長，可能會有部分細胞漂浮生長；

6.建議使用TC表面處理的高貼培養(yǎng)瓶或明膠、多聚賴氨酸等包被的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞，有利于細胞貼壁生長。

【SNL-356】LNCaP clone FGC(人前列腺癌細胞)

【SNLM-356】人前列腺癌細胞專用培養(yǎng)基

公 司 簡 介

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