ko小鼠+原代細(xì)胞提取，體內(nèi)體外聯(lián)合出擊

原代細(xì)胞（Primary cells）是指來(lái)源活體組織，經(jīng)特定分離方法制備而成的初始細(xì)胞。原代細(xì)胞離體時(shí)間短且不經(jīng)過(guò)永生化過(guò)程，其生物學(xué)特性未發(fā)生很大變化，仍保持原有的遺傳特征，可更好地反映細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)狀態(tài)，從而獲得與體內(nèi)生理功能更接近的數(shù)據(jù)。

1. 基因敲除小鼠原代細(xì)胞提取的應(yīng)用

從某個(gè)特定基因敲除（Knock out，KO）小鼠的特定組織中提取原代細(xì)胞，則可直接得到目的基因不表達(dá)的原代細(xì)胞模型，且與我們?cè)贙O小鼠上的研究具有更好的承接性，從而讓我們想要證實(shí)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康母�具有說(shuō)服性。

近年來(lái)，多個(gè)發(fā)表在高分期刊如Scientific Reports的文章均有采用KO小鼠的原代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的案例。另外，KO小鼠的原代細(xì)胞還可用于細(xì)胞水平的藥物篩選、藥物評(píng)價(jià)等方面。

2. 基因敲除小鼠原代細(xì)胞提取服務(wù)平臺(tái)

賽業(yè)生物完全性基因敲除小鼠是通過(guò)CRISPR/Cas9技術(shù)，針對(duì)靶基因設(shè)計(jì)和構(gòu)建gRNA與Cas9表達(dá)質(zhì)粒，造成目的基因的功能區(qū)域被敲除，獲得全身所有的組織和細(xì)胞中都不表達(dá)該基因的小鼠模型。我們目前已經(jīng)建立了上萬(wàn)種的KO小鼠模型庫(kù)，可為客戶提供多種KO小鼠原代細(xì)胞的需求。

（1） 現(xiàn)有海量的基因敲除小鼠資源庫(kù)

超16000品系CRISPR-AI敲除小鼠資源庫(kù)提供豐富的基因敲除小鼠品系，可大幅度縮短從基因敲除模型構(gòu)建到原代細(xì)胞提取的周期。

賽業(yè)生物敲除小鼠資源庫(kù)包括心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、腫瘤、免疫、代謝等多種疾病相關(guān)基因的KO小鼠模型。根據(jù)研究目的基因不同，我們可提取的原代細(xì)胞類型包括：上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、肌細(xì)胞，其中每種細(xì)胞包含20~30種不同的組織來(lái)源，可最大限度滿足不同客戶的需求。

（2）一站式細(xì)胞提取、傳代培養(yǎng)及檢測(cè)平臺(tái)

賽業(yè)生物在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域深耕15年，具備豐富的細(xì)胞原代提取、培養(yǎng)及檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)。原代細(xì)胞均取自新鮮組織，每批細(xì)胞都經(jīng)過(guò)免疫熒光/流式細(xì)胞方法檢測(cè)細(xì)胞的復(fù)蘇活性和增殖能力等，此外，賽業(yè)生物還可提供腫瘤細(xì)胞、體細(xì)胞常規(guī)檢測(cè)、免疫學(xué)檢測(cè)、組織學(xué)檢測(cè)、干細(xì)胞干性分析和血管形成等常規(guī)細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù)。

（3）平臺(tái)成熟穩(wěn)定

賽業(yè)生物作為一家綜合解決方案提供商，依托超16000品系的KO小鼠資源庫(kù)、高效且智能化的模式動(dòng)物定制平臺(tái)、藥物篩選評(píng)價(jià)小鼠模型平臺(tái)、成熟的細(xì)胞技術(shù)服務(wù)平臺(tái)等，建立了多位一體的創(chuàng)新性CRO平臺(tái)服務(wù)網(wǎng)絡(luò)，以服務(wù)于各種領(lǐng)域的科學(xué)研究及藥物研發(fā)篩選，并與全球100多個(gè)國(guó)家和地區(qū)的數(shù)萬(wàn)名科學(xué)家及企事業(yè)單位建立了廣泛的合作，產(chǎn)品和技術(shù)已直接應(yīng)用于包括CNS（Cell，Nature, Science）三大期刊在內(nèi)的4800余篇學(xué)術(shù)論文。賽業(yè)生物已獲得ISO9001:2015和AAALAC雙認(rèn)證，確保所有產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。

原代細(xì)胞提取成功率對(duì)個(gè)人操作技術(shù)和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的要求很高，而且還需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定，這也是一項(xiàng)技術(shù)上的考驗(yàn)。

在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域有實(shí)力的，缺少賽業(yè)在模式動(dòng)物領(lǐng)域的積累。

在模式動(dòng)物領(lǐng)域?qū)嵙Φ�，缺少賽業(yè)細(xì)胞生物學(xué)平臺(tái)的沉淀。

從體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)到體內(nèi)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，找賽業(yè)，就對(duì)了!

3. 服務(wù)流程

☑ 提供細(xì)胞信息

☑ 確定服務(wù)方案

☑ 協(xié)議簽訂

☑ 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行

☑ 細(xì)胞鑒定及檢測(cè)

☑ 項(xiàng)目交付

4. 成功案例

圖1. 卵巢上皮細(xì)胞，20X

圖2. 動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞，5X

圖3. 心房肌細(xì)胞，5X

圖4. 動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，5x

參考文獻(xiàn)：

1. Selective deletion of endothelial cell calpain in mice reduces diabetic cardiomyopathy by improving angiogenesis.

Diabetologia. 62(5):860-872. doi: 10.1007/s00125-019-4828-y.

2. TREM2 promotes Aβ phagocytosis by upregulating C/EBPα-dependent CD36 expression in microglia.

Scientific Reports.7:11118 doi: 10.1038/s41598-017-11634-x.