BAC打靶技術大片段人源化小鼠 — TurboKnockout基因編輯

CRISPR/Cas9技術是當前構建基因編輯小鼠的常用技術，但通常情況下，大片段的基因敲入或者人源化小鼠利用CRISPR/Cas9技術構建難度較高。此外CRISPR/Cas9技術可能出現(xiàn)的脫靶效應以及專利糾紛問題會對藥企帶來風險。

針對上述問題，賽業(yè)生物為您推薦TurboKnockout，TurboKnockout基因編輯技術建立在傳統(tǒng)ES打靶技術之上，基因修飾準確，效果穩(wěn)定，無脫靶效應，可通過BAC重組實現(xiàn)高達300kb的大片段基因敲入，且通過在ES水平實現(xiàn)多步BAC重組，可大大縮短項目周期，且與CRISPR/Cas9技術相比，TurboKnockout技術無專利糾紛困擾，是涉及新藥研發(fā)項目常用的技術。

細菌人工染色體（BAC）是低拷貝載體，可容納300kb以上的外源DNA，通過BAC同源重組或定點特異性重組的方式，達到實現(xiàn)用人基因組片段替代相應小鼠基因組片段的目的，是構建人源化小鼠模型的經(jīng)典策略。

服務流程

Step1 打靶載體設計和構建

Step2 電轉(zhuǎn)ES篩選陽性細胞

Step3 首建鼠制備

Step4 F1繁殖與篩選

服務流程

BAC重組可實現(xiàn)300kb大片段基因編輯
由于受DNA克隆載體容量的限制，制作基因修飾動物的外源基因片段通常小于30kb，因此某些調(diào)控基因活性的重要元素不可避免地被丟失。BAC可容納300kb以上的外源DNA，通過BAC重組可引入更大的基因及調(diào)控序列，從而更接近于內(nèi)源基因的表達模式。

TurboKnockout無脫靶效應
TurboKnockout基因敲除技術建立在傳統(tǒng)ES打靶技術之上，基因修飾準確，效果穩(wěn)定，無脫靶效應，可勝任難度較高的小鼠基因編輯。

無技術專利糾紛
與CRISPR/Cas9技術相比，TurboKnockout技術無專利糾紛困擾，是涉及新藥研發(fā)項目常用的技術。

周期更短
TurboKnockout基因編輯技術建立在傳統(tǒng)ES打靶技術之上，跨越“嵌合體”階段并自刪除Neo以減少兩代繁育時間，ES打靶快至6個月。同時，TurboKnockout可在ES水平做多步BAC重組，更能縮短實驗周期。