人免疫球蛋白輕鏈ELISA試劑盒幾項(xiàng)具體 操作步驟

人免疫球蛋白輕鏈lambda（λ-IgLC）ELISA試劑盒 操作步驟 
    .標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰�倍�?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 
    8 ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
    4 ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
    2 ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
    ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
    0.5 ng/L號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品50μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入50μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 
    2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品0μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。 
    3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 
    4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用 
    5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 
    6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
    7.溫育：操作同3。 
    8.洗滌：操作同5。 
    9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘. 
    0.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 
    .測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。