食品中細(xì)菌的提取 -沙門氏菌的檢測
瀏覽次數(shù):2172 發(fā)布日期:2019-1-24
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一、沙門氏菌檢測
沙門氏菌病是指由各種類型沙門氏菌所引起的對人類、家畜以及野生禽獸不同形式的總稱。沙門氏菌的病原體。屬腸菌科,革蘭氏陰性腸道桿菌。已發(fā)現(xiàn)的近一千種(或菌株)。按其抗原成分,可分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。
實驗過程
1、稱取25g(mL)樣品放入盛放有225mL緩沖蛋白胨水(BPW)的無菌拍打均質(zhì)袋中,用拍打式均質(zhì)器拍打1min-2min。如需調(diào)整pH值,用1mol/L無菌NaOH或HCL調(diào)pH至6.8±0.2
2、使用均
質(zhì)袋,可直接進(jìn)行培養(yǎng)于36℃±1℃,培養(yǎng)8h~18h
3、輕輕搖晃培養(yǎng)過的樣品混合物,取1mlL(可使用SOCOREX稀釋移液器),轉(zhuǎn)種于10mL亞硒酸鹽胱氨酸増菌液SC內(nèi),于36℃±1℃培養(yǎng)18h~24h。同時取1mL,轉(zhuǎn)種于10mLTTB內(nèi),于42℃±1℃培養(yǎng)
4、分別用接種環(huán)取增菌液1環(huán),劃線接種于一個BS瓊脂平板于36℃±1℃培養(yǎng)40h~48h和一個HE瓊脂平板于36℃±1℃分別培養(yǎng)18h~24h觀察各個平板上生長的菌落
各個平板上生長的菌落
* BS瓊脂 菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色 或灰色,菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色;
* HE瓊脂 藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或幾乎全黑色
* XLD 瓊脂 菌落呈粉紅色,或帶不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或呈現(xiàn)全部黑色的菌落;有些菌株為黑色菌落,帶或不帶黑色中心
鑒定 采用專用的試劑進(jìn)行鑒定。
二、拍打式均質(zhì)器和稀釋移液器
1、wiggens拍打式均質(zhì)器
* 最佳細(xì)菌萃取,經(jīng)過拍打式均質(zhì)后細(xì)菌沒被破壞
* 超級舒適。容易插入均質(zhì)袋, 在均質(zhì)結(jié)束時,葉片并排?。密封系統(tǒng)防止液 體從均質(zhì)袋頂部溢出
* 鋼化玻璃制可視窗,易于觀察(W 型)
* 工作時間1s-9min59s可調(diào),或者選擇連續(xù)工作模式免維護(hù)
* 無碳刷電機(jī)
2、socorex稀釋移液器
移液器的金屬吸嘴可以安裝細(xì)而長的麥管吸頭,所以該移液器可以從細(xì)長的容器中取樣 ( 如拍打均質(zhì)器的樣品袋 )在細(xì)菌學(xué)的研究中,該移液器經(jīng)常用來替代刻度玻璃移液管進(jìn)行1:10稀釋樣品研究。