電泳實(shí)驗(yàn)的危害與防護(hù)注意事項(xiàng)

1.DNA電泳與溴化乙錠

“DNA的瓊脂糖凝膠電泳”是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)型實(shí)驗(yàn)。“質(zhì)粒DNA的分離、純化和鑒定”在很多學(xué)校也是必開(kāi)的綜合性實(shí)驗(yàn)。這些涉及到DNA的提純及鑒定的實(shí)驗(yàn)都會(huì)用到高度靈敏的熒光染色劑溴化乙錠對(duì)DNA進(jìn)行染色。EB是強(qiáng)誘變劑，具有高致癌性，會(huì)在60～70 cc蒸發(fā)，所以在學(xué)生實(shí)驗(yàn)中要特別注意其安全使用，嚴(yán)禁隨便丟棄。在實(shí)驗(yàn)中使用及實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處理應(yīng)注意以下事項(xiàng)。

1.1 使用中注意事項(xiàng)

 實(shí)驗(yàn)室涉及到EB的操作應(yīng)統(tǒng)一固定在實(shí)驗(yàn)室的某一角落，稱量固體時(shí)要帶面罩和手套，使用含有EB的溶液務(wù)必帶上手套。同時(shí)不要在膠太熱的時(shí)候加EB，以防止因蒸發(fā)被吸入。接觸到EB的玻璃器皿應(yīng)集中放置并專門使用，污染到EB的槍頭、抹布、手套及EB染色跑完的膠，回收至棕色的玻璃瓶中，定期進(jìn)行焚燒處理舊。桌面或物體表面污染到EB時(shí)，可用活性碳進(jìn)行處理。

 1.2  廢EB溶液處理
 (1)EB濃溶液（濃度大于0.5 mg/mI）的凈化處理
先將EB溶液用水稀釋至濃度低于0.5 mg/mI，加人1倍體積的5％次高錳酸鉀，小心混勻后再加1倍體積的2.5 moL/L鹽酸。小心混勻，于室溫放置數(shù)小時(shí)；加入l倍體積的2.5 mol/L氫氧化鈉，小心混勻后可丟棄該溶液，統(tǒng)一處理。

 (2)EB稀溶液(濃度小于0.5 mg/mI)的凈化處理按1 mg/mL的量加入活性炭，不時(shí)輕搖混勻，室溫放置1 h；用濾紙過(guò)濾溶液，丟棄濾液并將活性碳與濾紙密封后丟棄，統(tǒng)一處理。

2. 聚丙烯酰胺凝膠電泳與有毒、有害物質(zhì)

聚丙烯酰胺凝膠電泳在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中是常用的實(shí)驗(yàn)手段，涉及到蛋白質(zhì)分離純化及鑒定、蛋白質(zhì)分子量及等電點(diǎn)測(cè)定的實(shí)驗(yàn)都會(huì)使用到該電泳方法，如“聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)”、“SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量”、“聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦法測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)”等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)。在聚丙烯酰胺凝膠制備過(guò)程中用到以下有毒、有害物質(zhì)：

2.1   丙烯酰胺
 丙烯酰胺具有很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，同時(shí)還有生殖、發(fā)育毒性。神經(jīng)毒性作用表現(xiàn)為周圍神經(jīng)退行性變化和腦中涉及學(xué)習(xí)、記憶和其他認(rèn)知功能部位的退行性變化。實(shí)驗(yàn)還顯示丙烯酰胺是一種可能致癌物。丙烯酰胺可通過(guò)皮膚吸收及呼吸道進(jìn)入人體，且累積毒性，不容易排毒。因此，稱量固體丙烯酰胺粉末和處理它們的溶液時(shí)必須戴手套和口罩。當(dāng)丙烯酰胺聚合為聚丙烯酰胺凝膠時(shí)則為無(wú)毒的，但操作時(shí)仍要小心，凝膠內(nèi)可能有少量未聚合的丙烯酰胺。

2.2  甲叉雙丙烯酰胺
 甲叉雙丙烯酰胺是丙烯酰胺形成凝膠的交聯(lián)劑，因有取代基丙烯酰胺，因此具有一定的毒性，能輕微刺激眼睛、皮膚和粘膜。稱量固體粉末和處理它們的溶液時(shí)需戴手套和口罩，應(yīng)避免與人體長(zhǎng)時(shí)間直接接觸，誤碰觸時(shí)應(yīng)用清水洗凈。

2.3  TEMED
 TEMED是形成凝膠反應(yīng)所用的加速劑，也具有強(qiáng)神經(jīng)毒性，應(yīng)防止誤吸，操作時(shí)快速，存放時(shí)密封。

2.4  過(guò)硫酸銨
 過(guò)硫酸銨是丙烯酰胺與甲叉雙丙烯酰胺進(jìn)行化學(xué)聚合的引發(fā)劑，對(duì)黏膜和上呼吸道組織、眼睛和皮膚有極大危害性。吸人可致命。操作時(shí)需戴合適的手套、安全眼鏡和面罩，始終在通風(fēng)櫥里操作，操作完后徹底洗手。

2.5  十二烷基硫酸鈉(SDS)
 SDS是·種陰離子表面活性劑，與蛋白形成復(fù)合物，用于測(cè)定蛋白質(zhì)分子量。SDS有毒，是一種刺激物，能對(duì)眼睛造成嚴(yán)重?fù)p傷，可因吸入、咽下或皮膚吸收而損害健康。稱量及配溶液時(shí)不要吸人其粉末，需戴合適的手套、面罩和護(hù)目鏡。

2.6  巰基乙醇
 它在測(cè)定蛋白質(zhì)分子量時(shí)用于處理樣品，吸入、攝人或經(jīng)皮膚吸收后會(huì)中毒。其中毒表現(xiàn)有紫紺、嘔吐、震顫、頭痛、驚厥、昏迷，甚至死亡；對(duì)眼、皮膚有強(qiáng)烈刺激性；對(duì)環(huán)境有危害；對(duì)水體可造成污染。應(yīng)在通風(fēng)櫥里操作，佩戴面罩，戴乳膠手套。

3.  RNA提取與有毒、有害溶劑

“動(dòng)物肝臟RNA的制備和純度測(cè)定”是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課中必開(kāi)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，RNA的提取過(guò)程需要用到溶劑去除蛋白質(zhì)，這些溶劑對(duì)人體具有一定的毒性。

 3.1  氯仿
 它對(duì)皮膚、眼睛、黏膜和呼吸道有刺激作用，是一種致癌劑，可損害肝和腎。它也易揮發(fā)，應(yīng)避免吸入揮發(fā)的氣體；操作時(shí)需戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里進(jìn)行。

 3.2  異戊醇
 它被吸人、口服或經(jīng)皮膚吸收有麻醉作用。其蒸氣或霧對(duì)眼睛、皮膚、粘膜和呼吸道有刺激作用，可引起神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂，長(zhǎng)時(shí)間接觸有麻醉作用。操作時(shí)應(yīng)戴合適的手套和安全眼鏡并始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里進(jìn)行。

 3.3  含水酚液
 它含有苯酚，對(duì)皮膚、粘膜有強(qiáng)烈的腐蝕作用，可抑制中樞神經(jīng)或損害肝、腎功能。吸人高濃度苯酚蒸氣可致頭痛、頭暈、乏力、視物模糊、肺水腫等疾病。其慢性中毒可引起頭痛、頭暈、咳嗽、惡心、嘔吐。稱量苯酚時(shí)應(yīng)佩戴防塵口罩，操作溶液時(shí)戴合適的手套和安全眼鏡，并始終在化學(xué)通風(fēng)櫥里進(jìn)行。它一旦接觸皮膚，立即用大量流動(dòng)清水沖洗，至少15 min。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后產(chǎn)生的含酚廢液可加入次氯酸鈉或漂白粉煮一下，使酚分解為二氧化碳和水，再進(jìn)行排放。

有機(jī)溶劑及實(shí)驗(yàn)廢液等實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)倒人盛放廢液的容器中，然后統(tǒng)一回收，集中處理。

 4. 其它有毒、有害物質(zhì)

“氨基酸的分離與鑒定”也是生物化學(xué)中必開(kāi)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，茚三酮是氨基酸的顯色劑，一般是配成溶液在噴霧器中噴霧使用。茚三酮經(jīng)消化道攝入和吸人都有害，對(duì)眼、呼吸系統(tǒng)和皮膚有刺激作用；皮膚反復(fù)接觸能引起皮膚過(guò)敏。使用中應(yīng)避免吸入霧滴或蒸氣；避免與眼接觸；使用橡膠或塑料手套、面罩以及護(hù)目鏡。