感受態(tài)專題：細胞瞬時轉(zhuǎn)染技術

原理：

通過脂質(zhì)體介導轉(zhuǎn)染法及電穿孔等基因轉(zhuǎn)染技術，將靶基因?qū)�入細胞，一般在轉(zhuǎn)染后48小時左右，靶基因即可在細胞內(nèi)表達。根據(jù)不同的實驗目的，48小時后即可進行靶基因表達的檢測等實驗。

應用：

觀察目的基因及其表達蛋白在某種細胞中的功能（短時間即可進行觀察，但效應會很快丟失）。

一般流程：

1）細胞接種：轉(zhuǎn)染實驗前天接種細胞，各種細胞的平板密度依據(jù)各種細胞的生長率和細胞形狀而定。進行轉(zhuǎn)染當天細胞密度應達到60%~80%覆蓋。

2）細胞轉(zhuǎn)染（脂質(zhì)體、電穿孔、FuGENE6等）

3）48小時以后鑒定目的基因的表達情況。

前期準備：

l構建好的外源基因載體，或目的基因基本信息。

l待轉(zhuǎn)染的細胞系（1×106個細胞，可傳代，倍增時間小于48小時）以及細胞培養(yǎng)條件的說明。

l若需要檢測靶基因的表達，請?zhí)峁┫鄳�抗體。

結(jié)果呈現(xiàn)：

構建好的瞬時轉(zhuǎn)染細胞及相關的外源基因表達分析。