給力促銷,全線8折!默克攜手Roche解析理想的轉(zhuǎn)染試劑

細胞轉(zhuǎn)染效率低！
具有細胞毒性！
實驗條件摸索難，重復(fù)性不佳！
如果您使用的是化學(xué)法細胞轉(zhuǎn)染，一定不要錯過本次分享。

細胞轉(zhuǎn)染 是指將外源基因如 DNA，RNA 等導(dǎo)入細胞內(nèi)的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細胞基因功能、實現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目，各有千秋，然而沒有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細胞種類、滿足所有實驗需求和目的，成分控認為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機理對轉(zhuǎn)染效果及細胞生理作用影響顯著，是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù)，選試劑時要留意成分哦。



嚴格來講，轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學(xué)法、物理法（電穿孔、顯微注射等）以及病毒介導(dǎo)法，沒有一種方法是放之四海而皆準。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基于各類轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)法轉(zhuǎn)染。

• 基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與 DNA 通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA 復(fù)合物，粘附到細胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì)。pH 值，鈣離子濃度，DNA 濃度，沉淀時間，細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長，且重復(fù)性不佳。

• 基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹 DNA，借助脂質(zhì)膜將 DNA 導(dǎo)入細胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較廣泛的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA 并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負電 的 DNA 自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成 DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細胞。此方法操作簡單，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細胞毒性，可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。

• 基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復(fù)合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細胞毒性相對較大，后者細胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。

• 以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。

新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同專利配方的脂類（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的專利成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢，且操作更加簡單，易于高通量

羅氏 X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性，在超過 350 株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證，尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn)。
 

圖 1. 兩種試劑對 CHO-K1 細胞轉(zhuǎn)染帶 GFP 標記的質(zhì)粒，A 和 C 是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B 和 D 是明場顯微圖. 與競爭產(chǎn)品比較，X-tremeGENE HP 表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性

圖 2. 不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENE HP 試劑遠優(yōu)于其他試劑

超過 350 種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證（點擊以下圖片即可選購）

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默克自 2015 年成為羅氏生化試劑的全球獨家代理，并于 2017 年擴大代理協(xié)議，增加對 KAPA PCR/qPCR 產(chǎn)品及羅氏自有核酸提取、qPCR 產(chǎn)品的代理。至今，Merck 代理的 Roche 產(chǎn)品可以提供從細胞培養(yǎng)和功能分析、基因機理研究到蛋白機理研究的完整方案：

2018 年 5 月 1 日～6 月 30 日，默克回饋新老客戶， Roche 全線產(chǎn)品一律 8 折，包括 Roche 明星產(chǎn)品線：
• X-tremeGENE 轉(zhuǎn)染試劑
• 細胞功能檢測試劑盒，如凋亡、毒性、活力、增殖等
• DIG 標記和檢測系統(tǒng)
• PCR 和 qPCR 檢測試劑
• Coaktail 蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑

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