在細(xì)胞相關(guān)研究中,準(zhǔn)確和高效評(píng)估細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量至關(guān)重要,它影響著下游的研究、分析。通常情況下,細(xì)胞數(shù)和細(xì)胞大小這些常用細(xì)胞參數(shù)都是用肉眼測(cè)定這種比較主觀的方法,既耗時(shí)又不可靠,往往產(chǎn)生不正確的結(jié)論進(jìn)而對(duì)下游的研究造成嚴(yán)重影響。法國(guó)Bertin Technologies公司的InCellis智能成像系統(tǒng)發(fā)布了內(nèi)置細(xì)胞融合度檢測(cè)App,完美解決了這一問(wèn)題,簡(jiǎn)單的幾步操作就可完成貼壁細(xì)胞細(xì)胞融合度的自動(dòng)計(jì)算。
方法
MCF7(胸腺癌細(xì)胞)培養(yǎng)于37℃的DMEM培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中。然后使用InCellis智能成像系統(tǒng)的細(xì)胞融合App進(jìn)行后續(xù)3天的細(xì)胞融合度測(cè)定,每隔24小時(shí)測(cè)定一次。
在培養(yǎng)的day-1、day-2和day-3的相同時(shí)間點(diǎn),分別使用10×和20×倍率在相差模式下記錄一系列照片以進(jìn)行準(zhǔn)確的融合度計(jì)算,每組記錄使用4個(gè)不同視野。
結(jié)果
在細(xì)胞融合度小于70%時(shí),肉眼下會(huì)存在很多不均勻的區(qū)域從而會(huì)因研究者的主觀因素而造成統(tǒng)計(jì)結(jié)果的較大誤差,而使用融合度App,可以通過(guò)不同視野下的比對(duì),從而消除這一誤差,產(chǎn)生非常穩(wěn)定可靠的統(tǒng)計(jì)結(jié)果(小于10%標(biāo)準(zhǔn)差)。在本融合度App中,使用10×或20×倍率下4個(gè)不同視野進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
這里同時(shí)給出了使用Malassez血細(xì)胞計(jì)數(shù)板和InCellis智能成像系統(tǒng)內(nèi)置細(xì)胞計(jì)算App進(jìn)行細(xì)胞計(jì)算的結(jié)果,三者都具有非常好的一致性。(如上圖所示)
結(jié)論
InCellis智能成像系統(tǒng)的細(xì)胞融合度App提供了非常可靠的自動(dòng)細(xì)胞融合度分析,快捷、高效、結(jié)果非常穩(wěn)定且無(wú)主觀因素的影響。
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