普瑞麥迪CUT&Tag Assay Kit免費(fèi)試用裝等你來領(lǐng)取

CUT&Tag Assay Kit
由普瑞麥迪-研發(fā)團(tuán)隊推出的CUT&Tag assay kit，完美的解決了ChIP-Seq給您帶來的這些苦惱，成為ChIP-Seq的完美替身！
 

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CUT&Tag簡介
CUT&Tag是針對ChIP-Seq的局限性而創(chuàng)建的研究基因組中組蛋白修飾以及染色質(zhì)結(jié)合蛋白和DNA相互作用的高效新技術(shù)。盡管與ChIP-Seq原理相似，CUT&Tag可以在新鮮細(xì)胞原生的狀態(tài)下，利用Tn5轉(zhuǎn)座酶復(fù)合體轉(zhuǎn)座的特性在獲取片段化DNA的同時完成了末端添加建庫測序所需的擴(kuò)增引物及條形碼序列。它具備了操作簡單快速 （1-2天可完成建庫），無需交聯(lián)固定和超聲片段化，起始細(xì)胞數(shù)少（通常至少降低十倍以上），測序量和成本大大減少（通常降低五到十倍以上），信噪比好，重復(fù)性高等優(yōu)勢。在表觀遺傳和基因調(diào)控等方面有及其重要的意義！

實(shí)驗(yàn)流程
首先ConA beads（Concanavalin A-coated magnetic beads）與細(xì)胞膜或核膜相結(jié)合，隨后通過穿孔劑對細(xì)胞進(jìn)行穿孔處理，改變其通透性，依次加入和靶蛋白相對應(yīng)的一抗、二抗和pA-Tn5 Transposase進(jìn)行孵育，再通過Mg2+激活Tn5酶，Tn5酶在激活的狀態(tài)下會定向切割靶蛋白對應(yīng)的DNA片段，同時在切割的DNA兩端加上文庫擴(kuò)增的序列接頭，以便于直接對回收的DNA片段進(jìn)行PCR建庫。隨后文庫質(zhì)量檢測合格后，便可直接上機(jī)測序。
 

我們的優(yōu)勢
√細(xì)胞起始量較低(單細(xì)胞-5*10⁵)，從百萬級降低到單細(xì)胞水平
√結(jié)果重復(fù)性較高，且信噪比較高
√把繁瑣的ChIP流程縮短至1-2天的時間
√操作流程簡單，無需甲醛交聯(lián)、細(xì)胞破碎和超聲片段化DNA
√簡化了文庫構(gòu)建流程，在轉(zhuǎn)座子上添加了‘接頭’，只需要簡單的PCR即可獲得高質(zhì)量NGS文庫
√與ChIP相比，測序深度減少10倍左右
 

H3K4me1抗體的CUT&Tag數(shù)據(jù)顯示，與IgG對照組相比，H3K4me1 CUT&Tag檢測到了H3K4me1的信號峰，且信噪比較高。