PCR技術(shù)以特異性的寡核苷酸引物放大擴增特定的DNA片段,一對引物在單次反應(yīng)擴增單個基因。通常每個靶標分別進行檢測,即單重PCR反應(yīng),但當(dāng)我們需要檢測多個靶標基因時,單重PCR費時費力同時無法排除不同樣品孔間的加樣差異,如內(nèi)參基因的歸一化檢測,需要在同一反應(yīng)管中檢測內(nèi)參基因和目標基因,多重PCR實驗無疑是最簡單直接的解決方案。
多重PCR也稱復(fù)合PCR,是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上改進并發(fā)展起來的一種PCR擴增技術(shù),即可在一個反應(yīng)體系中加入兩對以上引物,同時擴增出多個核酸片段。在熒光定量PCR(qPCR)和數(shù)字PCR(digital PCR)技術(shù)中,多重PCR設(shè)計配合多熒光通道可以進行更多靶標的相對于標準品的檢測和直接的絕對定量檢測,既具有單重PCR的敏感性和特異性,同時又比單重PCR更加高效、快捷和經(jīng)濟。
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