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貝克曼發(fā)布11月離心文獻(xiàn)快報(bào)-訂閱贏精美禮品!

瀏覽次數(shù):7418 發(fā)布日期:2020-12-4  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處
小貝離心文獻(xiàn)快報(bào)-2020年11月
 
 
 

A. 病毒分離

 
 

1、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究表明,病毒樣顆粒 (VLPs) 疫苗可同時(shí)引起細(xì)胞和體液免疫應(yīng)答。該研究發(fā)現(xiàn),獲得的新型SVA VLP具高度的免疫還原性,其VLP疫苗提供的保護(hù)水平與滅活的SVA疫苗水平相似,從而為防御和消除SVA提供比滅活疫苗更優(yōu)的候選疫苗。Potent Protective Immune Responses to Senecavirus Induced by Virus-Like Particle Vaccine in Pigs (病毒樣顆粒疫苗對(duì)豬引起的塞內(nèi)卡病毒的強(qiáng)保護(hù)性免疫反應(yīng)) Vaccines, 15 September 2020, 8, 532.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman XPN-100 Ultracentrifuge, SW 41 Ti rotor.

•  目的:SVA VLPs的制備及表征。

•  離心條件參數(shù):4 C, 110 000 x g, 3 h.

DOI:10.3390/vaccines8030532

 

2、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究運(yùn)用多重定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法確定在用以共生純化病毒樣顆粒(VLP)的細(xì)胞外泌體(EVs)的分泌物中發(fā)生的變化。在共同生產(chǎn)的部分中,與免疫激活,抗炎過(guò)程和應(yīng)答氧化反應(yīng)相關(guān)的蛋白質(zhì)(免疫調(diào)節(jié)蛋白如ITGB1,ENO3和PRDX5)被鑒定出來(lái), 這些發(fā)現(xiàn)提供了VLP胞外環(huán)境性質(zhì)以定義EVs特征及其蛋白質(zhì)譜的深刻見(jiàn)解,對(duì)開(kāi)發(fā)新下游分離策略或?qū)⑵溆米鞑《局委熥魟┚哂袧撛谝饬x。Molecular Characterization of the Coproduced Extracellular Vesicles in HEK293 during Virus-Like Particle Production (病毒樣顆粒生產(chǎn)過(guò)程中,于HEK293細(xì)胞中生成的共生細(xì)胞外泌體的分子表征) Journal of proteome. 25 September, 2020, 19, 4516-4532.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman L100 XP Centrifuge, SW 32 rotor.

•  目的:制備高度濃縮純化的HIV-1 Gag VLPs樣品。

•  離心條件參數(shù):4 C, 31 000 rpm, 2.5 h.

https://dx.doi.org/10.1021/acs.jprote me.0c00581

 

3、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究介紹了三種新型以重組型水皰性口炎病毒(rVSV-ZEBOV)為載體的HIV候選疫苗,并在Vero細(xì)胞中對(duì)三種疫苗的生產(chǎn)進(jìn)行小規(guī)模評(píng)估。研究發(fā)現(xiàn),Vero細(xì)胞上的生產(chǎn)動(dòng)力學(xué)取決于所用HIV gp表面蛋白,純化的病毒制劑符合WHO對(duì)殘留DNA和宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)含量的限制。最后,在小鼠實(shí)驗(yàn)中,所有三種rVSV-HIV候選疫苗均可誘導(dǎo)HIV gp140特異性抗體應(yīng)答。Evaluation of novel HIV vaccine candidates using recombinant vesicular stomatitis virus vector produced in serum-free Vero cell cultures (利用無(wú)血清Vero細(xì)胞培養(yǎng)物中產(chǎn)生的重組水泡性口炎病毒載體對(duì)新型HIV疫苗候選物進(jìn)行評(píng)估) Vaccine, 1 November, 2020.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Optima 80XP Ultracentrifuge, 70 Ti rotor.

•  目的:制備并純化用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的VSV構(gòu)建體。

•  離心條件參數(shù):30 000 rpm, 3.5 h.

https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2020.10.058

 

4、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究中,研究者利用低溫電子斷層掃描(cryo-ET)技術(shù)對(duì)受體結(jié)合蛋白在與受體結(jié)合的膜形成復(fù)合物時(shí),其促發(fā)F介導(dǎo)的融合的逐步過(guò)程進(jìn)行剖析。借用可促進(jìn)直接從上清液中檢查新鮮的,具有生物活性的病毒株的網(wǎng)格抗體捕獲方法,以及一系列可在融合過(guò)程中捕獲中間狀態(tài)的生物學(xué)工具,研究者可以直觀地看到當(dāng)一個(gè)原始的,真實(shí)的病毒顆粒與目標(biāo)受體相互作用,及從病毒結(jié)合受體的侵入到膜融合的過(guò)程。Human parainfluenza virus fusion complex glycoproteins imaged in action on authentic viral surfaces (人副流感病毒融合復(fù)合糖蛋白在真實(shí)病毒表面的作用中的成像) PLOS Pathogens, 21 September, 2020, 16(9): e1008883.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman L8-80 M Ultracentrifuge, SW 28 rotor.

•  目的:病毒樣品制備與純化。

•  離心條件參數(shù):4 C, 25 000 rpm, 4 h.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1008883

 

5、

一項(xiàng)采用密度梯度超速離心技術(shù)的研究測(cè)試了pH 6-8的溶液中銅(Cu)和銀(Ag)對(duì)模型RNA和DNA病毒MS2和PhiX 174的影響。結(jié)果表明,銅和銀的組合使用在pH 7的MS2消毒中的顯示了協(xié)同作用。Inactivation of RNA and DNA viruses in water by copper and silver ions and their synergistic effect (銅和銀離子對(duì)水中RNA和DNA病毒的滅活作用及其協(xié)同作用) Water Research X, 5 November, 2020.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Optima L-90 K Ultracentrifuge, SW41 Ti rotor 和SW60 Ti rotor.

•  目的:MS2和PhiX 174噬菌體的制備及純化。

•  離心條件參數(shù):4 C, 32 000 rpm, 20 h.

https://doi.org/10.1016/j.wroa.2020.100077

 
 
 
 

B. 外泌體分離

 
 

1、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究探討了自噬激活的髓核細(xì)胞(NPC)和體外分泌microRNA產(chǎn)生的外泌體對(duì)髓核(NP)基質(zhì)降解的保護(hù)作用, 并闡述了自噬如何參與預(yù)防椎間盤(pán)退化(IDD)的新機(jī)制。Autophagy‐activated nucleus pulposus cells deliver exosomal miR‐27a to prevent extracellular matrix degradation by targeting MMP‐13 (自噬激活的髓核細(xì)胞可遞送外泌體miR-27a通過(guò)靶向MMP-13來(lái)防止細(xì)胞外基質(zhì)降解) Journal of Orthopaedic research, 10 October 2020, 1-12.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman L-100 XP Ultracentrifuge.

•  目的:外泌體分離。

•  離心條件參數(shù): 120 000 g, 2 h.

DOI: 10.1002/jor.24880

 

2、

一項(xiàng)采用差異超速離心(Differential ultracentrifugation)技術(shù)的研究表明,特定的外來(lái)體亞型是在Rab11家族成員標(biāo)記的Drosophila二次細(xì)胞和人類(lèi)癌細(xì)胞回收內(nèi)體多囊泡體中制成的。 此外,Rab11a標(biāo)記的外泌體從這些區(qū)室的優(yōu)先釋放是由耗盡外源谷氨酰胺的癌細(xì)胞觸發(fā)的。Glutamine deprivation alters the origin and function of cancer cell exosomes(谷氨酰胺的缺失對(duì)癌細(xì)胞外泌體源頭及功能的改變)The EMBO Journal. 28 July, 2020.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman 55.2 Ti or 70 Ti rotor.

•  目的:細(xì)胞外泌體分離。

•  離心條件參數(shù): 4 C, 100 000 -108 000 g, 2 h.

DOI 10.15252/embj.2019103009

 

3、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究評(píng)估了脂質(zhì)和跨膜酶CD73在刺激皮膚傷口愈合過(guò)程中外泌體生物活性中的參與。Exosomes for Wound Healing: Purification Optimization and Identification of Bioactive Components (外泌體用于傷口愈合: 外泌體純化的優(yōu)化和生物活性成分的鑒定。) Advanced Science. 2020; 1-16.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Optima XE-90 Ultracentrifuge, Type 45 Ti fixed-angle rotor.

•  目的:細(xì)胞外泌體分離。

•  離心條件參數(shù): 4 C, 100 000 x g or 150 000 x g, 70 min.

DOI: 10.1002/advs.202002596

 

4、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究首次證明了長(zhǎng)角血蜱在唾液中分泌類(lèi)似于外泌體的胞外囊泡并對(duì)其進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析,表明血蜱唾液衍生的外泌體樣囊泡在宿主-寄生蟲(chóng)關(guān)系中可能起重要作用。Proteomic Analysis of Exosome-Like Vesicles Isolated From Saliva of the Tick Haemaphysalis longicornis (從長(zhǎng)角血蜱唾液中分離出的外泌體樣囊泡的蛋白質(zhì)組學(xué)分析) Frontiers in Cellular and Infection Microbiology, 22 October 2020, Volume 10: 542319.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Optima L-100 XP Ultracentrifuge, SW 60 (44.5) rotor.

•  目的:H. longicornis唾液中外泌體的分離。

•  離心條件參數(shù): 1. 初步分離:4 C, 140 000 g, 3 h; 2. 洗滌參數(shù):150 000 g, 2 h; 3. 非連續(xù)性梯度離心: 250 000 g, 18 h.

DOI: 10.3389/fcimb.2020.542319

 

5、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究使用靜電力顯微鏡通過(guò)探測(cè)單個(gè)囊泡來(lái)研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤分泌的囊泡的物理特性。有趣的是,我們觀察到當(dāng)將更高濃度的Aβ42低聚物培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),外泌體的表面電荷就會(huì)更高。該結(jié)果表明,隨著細(xì)胞培養(yǎng)基中Aβ42濃度的增加,外泌體包含更多的Aβ42,這暗示這些外泌體可能充當(dāng)Aβ42的轉(zhuǎn)運(yùn)囊泡。Nanoelectrical characterization of individual exosomes secreted by Aβ42-ingested cells using electrostatic force microscopy (使用靜電力顯微鏡對(duì)由Aβ42攝取的細(xì)胞分泌的單個(gè)外泌體進(jìn)行納米電表征) Nanotechnology. 12 October, 2020, 32 025705.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Optima L-90 K Ultracentrifuge, Type 70 Ti rotor.

•  目的:細(xì)胞外泌體分離。

•  離心條件參數(shù): 4 C, 100 000 x g, 2 h.

https://doi.org/10.1088/1361-6528/abba58

 
 
 
 

C. 脂質(zhì)體分離

 
 

1、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究提供了原理證明,以進(jìn)一步促進(jìn)對(duì)自主組裝的混合脂質(zhì)納米顆粒的研究,將其作為核酸的有前景的遞送工具,例如miRNA。Hybrid lipid self-assembling nanoparticles for brain delivery of microRNA (用于microRNA的大腦遞送的自主組裝的混合脂質(zhì)納米顆粒) International Journal of Pharmaceutics, 02 August 2020, 588 119693.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Optima Max E Ultracentrifuge.

•  目的:將miRNA裝載入自主組裝的混合脂質(zhì)納米顆粒。

•  離心條件參數(shù): 4 C, 80 000 rpm, 40 min.

https://doi.org/10.1016/j.ijpharm.2020.119693

 

2、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究中,詳細(xì)描述了一種互補(bǔ)的無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成(CFPS)方法,為制備水通道蛋白脂蛋白體樣品提供了三種不同的策略。Functional Analysis of Aquaporin Water Permeability Using an Escherichia coli-Based Cell-Free Protein Synthesis System (使用基于大腸桿菌的無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)進(jìn)行水信道蛋白水滲透性的功能分析) Materials Today Bio, 31 July, 2020, 100071.

 
 

•  儀器型號(hào):Ultracentrifuge and suitable rotors (Beckman Coulter).

•  目的:蛋白質(zhì)樣品(水信道蛋白及無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì))的制備及純化。

•  離心條件參數(shù): 1. (水信道蛋白的制備及純化)4 C, 20 000 x g, 30 min. 2. 用于脂質(zhì)-無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成反應(yīng)的樣品制備:18 000 x g, 30 min (初步分離); 18 000 x g, 10 min (分離制備).

DOI: 10.3389/fbioe.2020.01000

 

3、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究通過(guò)生化和NMR方法表征了Vav2-SH2結(jié)構(gòu)域與脂質(zhì)和Y594磷酸化EphA2 JM的結(jié)合。這項(xiàng)研究提供了一種方法來(lái)研究復(fù)雜膜環(huán)境下的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用,也為今后研究膜環(huán)境在跨膜蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用中的意義提供了一種觀點(diǎn)。Biochemical and NMR characterization of the interactions of Vav2–SH2 domain with lipids and the EphA2 juxtamembrane region on membrane (Vav2-SH2結(jié)構(gòu)域與脂質(zhì)和膜上EphA2近膜區(qū)相互作用的生化及NMR表征) Biochemical Journal, 12 October 2020, 477: 3791-3801.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Optima MAX-XP Ultracentrifuge.

•  目的:脂質(zhì)體的制備。

•  離心條件參數(shù): 4 C, 50 000 g, 30 min.

https://doi.org/10.1042/BCJ20200300

 

4、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究表明,將胺官能化的納米金剛石(NDs)封裝在脂質(zhì)體中并進(jìn)行了研究,以觀察其光致發(fā)光性質(zhì)的變化。研究結(jié)果表明,功能化的NDs的光致發(fā)光特性發(fā)生了顯著變化,并且在脂質(zhì)體包封后更有潛力。該發(fā)現(xiàn)可用于開(kāi)發(fā)新型水分散型熒光雜交體脂質(zhì)體-NDs,并具有用于診斷和治療的藥物封裝能力(脂質(zhì)體療法)。也可以考慮具有為其他生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用定制其相應(yīng)可能性的全光學(xué)傳感器。Photoluminescent properties of liposome-encapsulated amine-functionalized nanodiamonds (脂質(zhì)體封載的胺官能化納米金剛石的光致發(fā)光特性) Nano Express, 27 October 2020, 030009.

 
 

•  儀器型號(hào):Beckman Coulter 90 L Ultracentrifuge.

•  目的:脂質(zhì)體的分離純化及制備。

•  離心條件參數(shù): 4 C, 38 000 rpm, 1h.

https://doi.org/10.1088/2632-959X/abc1c5

 

5、

一項(xiàng)采用超速離心技術(shù)的研究檢測(cè)了統(tǒng)計(jì)偶聯(lián)分析(SCA)是否可以應(yīng)用于菱形蛋白酶(分布最廣泛的膜蛋白),以識(shí)別獨(dú)立進(jìn)化以獲得特定功能的氨基酸“區(qū)段”,揭示其功能進(jìn)化的基礎(chǔ)。Decoding the Functional Evolution of an Intramembrane Protease Superfamily by Statistical Coupling Analysis (通過(guò)統(tǒng)計(jì)耦合分析對(duì)膜內(nèi)蛋白酶超家族的功能進(jìn)化進(jìn)行解碼) Structure, 3 November 2020, 28, 1-8.

 
 

•  儀器型號(hào):1. 細(xì)胞膜的分離:Beckman Optima Ultracentrifuge, a 70 Ti rotor. 2. 實(shí)時(shí)動(dòng)力學(xué)分析實(shí)驗(yàn):Optima MAX-XP Ultracentrifuge.

•  目的:1. 細(xì)胞膜的分離;2. 實(shí)時(shí)動(dòng)力學(xué)分析實(shí)驗(yàn)中蛋白脂質(zhì)體的分離與收集。

•  離心條件參數(shù): 1.細(xì)胞膜分離:10 C, 370 500 x g, 30 min. 2. 蛋白脂質(zhì)體的分離:600 000 x g, 30 min.

https://doi.org/10.1016/j.str.2020.07.015

 
 

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