SmartCycler II : 真正“聰明”的定量PCR儀

SmartCycler II是世界上獨(dú)一無(wú)二的能勝任多任務(wù)平行操作的定量PCR儀。她有方正的外觀，小巧的配件，精致的薄壁管，一切一切都是如此的出挑，甚至連為她專門優(yōu)化的試劑都彰顯著與眾不同——那居然是一顆顆躍動(dòng)的小珠！

與其它常見的定量PCR儀不同，SmartCycler II在設(shè)計(jì)上更為合理與體貼。相信我們大多數(shù)人都碰到過(guò)這樣的苦惱：實(shí)驗(yàn)室里幾個(gè)研究人員，不同的課題都需要使用儀器，有時(shí)就不得不犧牲一下自己的實(shí)驗(yàn)安排和進(jìn)度了。而SmartCycler II就可以完全解決這樣的麻煩。她采用16個(gè)I-CORE模塊（圖2）的設(shè)計(jì)，每個(gè)模塊都集成有自己的加熱/冷卻系統(tǒng)以及光學(xué)信號(hào)激發(fā)與檢測(cè)系統(tǒng)，每個(gè)模塊都可以獨(dú)立的操控和運(yùn)行，因此一臺(tái)SmartCycler II其實(shí)就相當(dāng)于16臺(tái)獨(dú)立的定量PCR儀。不同實(shí)驗(yàn)條件的樣品可以在一臺(tái)儀器上同時(shí)擴(kuò)增，也可以在一組樣品的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，隨時(shí)在其它空置的模塊上開始運(yùn)行其它的實(shí)驗(yàn)。這樣的設(shè)計(jì)，保證了儀器能夠被最高效的使用，而且，由于一套控溫系統(tǒng)只服務(wù)于一只反應(yīng)管，因此升降溫速度都非常快：升溫速度可達(dá)10℃/s，降溫也達(dá)到了2.5℃/s，通常要大約2小時(shí)才能完成的一輪45個(gè)循壞的兩步法定量PCR實(shí)驗(yàn)，在SmartCycler II上只需要45分鐘就夠了。多任務(wù)操作的靈活性結(jié)合系統(tǒng)的快速，賦予了SmartCycler II更高的有效通量，也保證了儀器能夠得到最充分的使用。

這種靈活性在我們優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件時(shí)更顯得重要。舉個(gè)簡(jiǎn)單的例子，在以前，如果我們對(duì)退火溫度和時(shí)間各做4個(gè)梯度，就需要16輪2小時(shí)的實(shí)驗(yàn)后才能匯總所有的結(jié)果進(jìn)行比較，現(xiàn)在有了SmartCycler II，只需不到一個(gè)小時(shí)！而一個(gè)實(shí)驗(yàn)的條件優(yōu)化，往往還牽涉到反應(yīng)體系中引物及探針（或染料）的濃度選擇等等，林林總總，SmartCycler II可以為我們節(jié)約多少寶貴的時(shí)間��！

而且，SmartCycler II的靈活性及快速，是建立在保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可重復(fù)性和盡可能寬的線性范圍的基礎(chǔ)之上的。獨(dú)立的模塊式設(shè)計(jì)，使得系統(tǒng)中反應(yīng)管的實(shí)際溫度，只受一個(gè)因素的影響，即模塊的控溫精度（<±0.5℃）；而傳統(tǒng)的板式設(shè)計(jì)，除了整塊板的控溫精度之外，還必須考慮一塊樣品板上不同位置之間的差異，即我們通常所說(shuō)的“邊緣效應(yīng)”。因此，除了個(gè)別離心式設(shè)計(jì)的系統(tǒng)之外，SmartCycler II的實(shí)驗(yàn)重復(fù)性表現(xiàn)，不遜于其它任何系統(tǒng)。不妨讓我們來(lái)看看實(shí)際的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)吧：用TxR/BHQ2標(biāo)記的探針對(duì)一段71bp的DNA片段進(jìn)行定量的結(jié)果，9組樣品從109個(gè)拷貝到10個(gè)拷貝，以10倍為一個(gè)梯度，每一個(gè)梯度做3次重復(fù)，圖3顯示的就是實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。我們可以看到，每一個(gè)梯度的3次重復(fù)結(jié)果都相互吻合得非常好（Cv<0.55%），而且在數(shù)量及這樣一個(gè)很寬的線性范圍內(nèi)，都可以獲得線性很好的數(shù)據(jù)（標(biāo)準(zhǔn)曲線的r2>0.99）。

SmartCycler II之所以能夠達(dá)到9個(gè)數(shù)量級(jí)的線性監(jiān)測(cè)范圍，源于高性能的光學(xué)系統(tǒng)。每一個(gè)獨(dú)立的I-CORE中，都整合有4個(gè)不同波長(zhǎng)的LED激發(fā)光源和4個(gè)相應(yīng)波長(zhǎng)的光電檢測(cè)器，經(jīng)過(guò)系統(tǒng)優(yōu)化，可以有效的進(jìn)行光譜分離。4通道的設(shè)計(jì)，使得我們?cè)趯?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程中可以自由的選擇合適的熒光染料，無(wú)論是成本低廉的SYBR Green，還是特異性更好的TaqMan或分子信標(biāo)探針，都可以使用；還可以選擇多重定量實(shí)驗(yàn)，對(duì)于經(jīng)常需要做相對(duì)定量的您而言，是不是非常方便呢？

SmartCycler II的軟件操作也非常方便，三級(jí)菜單設(shè)計(jì)，簡(jiǎn)單明了，即便是初學(xué)者，不消一個(gè)小時(shí)也可以熟練操作了。而且，SmartCycler II的全固件設(shè)計(jì)，使它擁有了極好的抗震性能，不但能夠?qū)崟r(shí)，甚至還能夠完成實(shí)地定量，因此，推出短短時(shí)間，就在疾病預(yù)防和控制，農(nóng)林畜牧業(yè)的病蟲害防治以及生物反恐等領(lǐng)域大放異彩。系統(tǒng)的通量可以非常容易的擴(kuò)展到96個(gè)樣品，在科研領(lǐng)域也得到了廣泛的認(rèn)可。Cepheid公司出品的SmartCycler II已成為目前全美市場(chǎng)年銷量第三的著名品牌。

心動(dòng)不如行動(dòng)！快來(lái)和我們一起加入 “聰明”定量之旅，共同享受SmartCycler II帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)樂趣吧！

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