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間標(biāo)磁珠——輕松分選任意細(xì)胞

瀏覽次數(shù):2777 發(fā)布日期:2014-10-13  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

我們知道,做細(xì)胞分選,首先要知道目的細(xì)胞與其它細(xì)胞相比,有什么特別的標(biāo)志,如常用的細(xì)胞表面CD marker,最簡(jiǎn)單的方法是選擇直接耦聯(lián)相應(yīng)抗體的磁珠,即所謂的直標(biāo)微珠,如用CD4 microbeads來(lái)直接分選CD4 + T細(xì)胞。
但是,美天旎的直標(biāo)磁珠多是針對(duì)小鼠、大鼠、人和靈長(zhǎng)類的,針對(duì)其它物種的直標(biāo)磁珠我們還在不斷研發(fā)中,又或者您關(guān)注的細(xì)胞類型較新,我們沒(méi)有相應(yīng)磁珠時(shí),我們還有沒(méi)有辦法用磁珠分選呢?答案是肯定的,美天旎有多種間標(biāo)微珠可供選擇,利用間標(biāo)微珠,幾乎可以分選任何物種的任意類型的細(xì)胞,只要目的細(xì)胞有特定的標(biāo)志和有相應(yīng)的一抗,我們就可以對(duì)其進(jìn)行磁性分選。
那么,美天旎的間標(biāo)微珠有哪些呢?

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  Anti-FluorochromeMicroBeads:即抗熒光素微珠

此類微珠上耦聯(lián)了熒光素,如FITC、PE、APC、Cy5、Cy7等。
如圖1:從人PBMC中分選CMV特異性T細(xì)胞,用PE標(biāo)記的CMVpp65/A2四聚體標(biāo)記CMV特異性T細(xì)胞,再用抗PE微珠將其從PBMC中陽(yáng)性分選出來(lái),本次分選過(guò)兩個(gè)MS柱。

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  Anti-BiotinMicroBeads和Streptavidin MicroBeads

二者均可以捕獲生物素耦聯(lián)的一抗所結(jié)合的細(xì)胞、生物大分子等,其區(qū)別在于:前者只識(shí)別耦聯(lián)了抗體和細(xì)胞的生物素,不會(huì)結(jié)合溶液中游離的生物素,而后者會(huì)識(shí)別游離生物素,因此,如果待分選細(xì)胞懸液中存在游離生物素,則最好選擇Anti-Biotin MicroBeads。
如圖2:先用CD3-Biotin標(biāo)記人PBMC中的CD3+細(xì)胞,再用Anti-Biotin MicroBeads進(jìn)行陽(yáng)性分選,過(guò)一次MS柱。

http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz/8XkUZCSyypeNibMmHd85pEUKqaknqVbghAyHrlG49r1ghdiaCOOicGBBgkbkCo0aReDoelLDTyzY3ZdTCBB4ibAk0Q/0
  Anti-Ig MicroBeads

適用于分選由無(wú)熒光素標(biāo)記的一抗所標(biāo)記的細(xì)胞,如Anti-Mouse IgM MicroBeads,可用于分選小鼠IgM型一抗識(shí)別的細(xì)胞。
如圖3:用CD16(mouse IgM型)一抗來(lái)標(biāo)記人外周血淋巴細(xì)胞,然后用Anti-Mouse IgM MicroBeads進(jìn)行陽(yáng)性分選,過(guò)一次MS柱。
因此,不夸張的說(shuō),結(jié)合直標(biāo)磁珠和間標(biāo)磁珠,我們幾乎可以分選任何物種中任意類型的細(xì)胞。

http://mmbiz.qpic.cn/mmbiz/8XkUZCSyypeNibMmHd85pEUKqaknqVbghAhIbqkd8tT7fPgmqwl6Zq8H0c3X0umTEwqIS8q8dPRvxialyDZGJhBw/0



 閱讀原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2014100013.html

發(fā)布者:杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司
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